菠菜中色素的提取分离模板.doc

菠菜中色素提取、分离及判定
一、试验目标
1、经过绿色植物色素提取，学习天然物质提取方法；
，经过菠菜色素提取和分离，了解天然物质分离提纯方法及原理
3、经过薄层色谱分析，掌握有机物色谱分析原理和方法。

绿色植物如菠菜叶中含有叶绿素（绿）、胡萝卜素（橙）和叶黄素（黄）等多个天然色素。
叶绿素存在两种结构相同形式即叶绿素a(C55H72O5N4Mg)和叶绿素b(C55H70O6N4Mg)，其差异仅是叶绿素a中一个甲基被甲酰基所替换从而形成了叶绿素b。它们全部是吡咯衍生物和金属镁络合物，是植物进行光合作用所必需催化剂。植物中叶绿素a含量通常是b3倍。尽管叶绿素分子中含有部分极性基团，但大烃基结构使它易溶于醚、石油醚等部分非极性溶剂。
胡萝卜素（C40H56）是含有长链结构共轭多烯。它有三种异构体，即a-胡萝卜素、β-胡萝卜素和γ-胡萝卜素，其中β-胡萝卜素含量最多，也最关键。在生物体内，β-胡萝卜素受酶催化氧化形成维生素A。现在β-胡萝卜素已可进行工业生产，可作为维生素A使用，也可作为食品工业中色素。
叶黄素（C40H56O2）是胡萝卜素羟基衍生物，它在绿叶中含量通常是胡萝卜素两倍。和胡萝卜素相比，叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
色谱法是一个物理分离方法，其原理是利用混合物中各成份物理化学性质差异，当选择某一条件使混合物中各成份流过支持剂或吸附剂时，各成份可因其物理性质不一样而分离。分离效果好坏关键在于条件选择。
薄层色谱是在玻片上涂布固体吸附剂，利用样品对固体吸附剂吸附能力不一样，选择对样品溶解（解附）能力不一样溶剂，将混合物各成份根据极性大小不一样随溶剂前进速度不一样而分开方法。
应用：薄层色谱能够用来分离、判别化合物，也能够用于跟踪反应进程。
Rf值和分子结构关系
Rf值越大，样品和固体吸附剂吸附越紧，即样品和固体吸附剂分子间作用力越大，说明样品极性越强或分子量越大。
本试验利用有机溶剂将菠菜中色素浸提出来，利用柱层析和薄层层析法将色素分离开来，依据各色素颜色、分子极性和Rf值关系、吸收光谱、荧光对分离出色素进行判定归属，讨论结构对Rf值、吸收光谱影响。
三、关键试剂及主、副产物物理常数
名称
分子量
性状
相对密度
熔点
沸点
溶解度
水
醇
醚
石油醚
无色透明液体，有煤油气味
-
-37
40-80
不溶
溶
溶
乙醇

无色透明液体，易挥发，有刺激性

-

溶
溶
溶
丙酮

无色液体，易挥发，辛辣甜味

-

溶
溶
溶
饱和氯化钠

无色透明立方晶体，白色粉末，味咸

801
1413
溶
无水NaSO4

白色粉末，无臭，味咸
884
1700
溶
不溶
四、关键试剂规格及用量
名称
规格
用量
摩尔数
菠菜叶
5g
五、试验装置
六、试验步骤
称取5克洗净晾干水分新鲜菠菜叶，用