2021年实验六微生物显微镜的直接计数法与微生物大小测定.ppt

一、目的要求
1. 掌握使用血球计数器进行微生物计数的方法。
   
2. 学习掌握测量微生物大小的基本方法。
实验六 微生物显微镜的直接计数法与微生物大小测定
2021/1/15
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二、基本原理

实验六 微生物显微镜的直接计数法与微生物大小测定
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记数室边长为1毫米，则其面积为1平方毫米。盖上盖玻片
后，，所以每个记数室体积
。

在计数时，通常以五个中方格的总菌数（每个中方格中数四
个小方格）即20个小方格的总菌数（求平均值）。
例如：设20个小方格中的总菌数为A，悬液稀释度B，那么
大格（） A/20×400×B。
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三、器材
显微镜；血球计数板；手揿计数器；盖玻片；
目镜测微尺；镜台测微尺。

    酵母菌菌悬液；
枯草杆菌和金黄色葡萄球菌染色标本。
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四、操作步骤

(1)先将计数板盖上盖片在显微镜下，从低倍找到计数器的位
置，不动。
(2)将稀释好的菌悬液摇匀，用滴管吸入由盖玻片边缘滴入让
　　其自行渗入，使室充满（不宜过多，也不可有气泡）。
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(3)静止3-5分钟，先在低倍镜观察，然后换成高倍
　　镜进行计数。样品不宜太浓或太稀，最好每小格
　　控制在5-10个菌体为宜，计数需要重复二次。取
　　平均值。先后二次误差太大，需再重复计数。
(4)清洗：计数板使用完毕后，再水中冲洗（切勿用
　　　　　硬物洗刷），洗后，自行凉干或吹干。
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首先把接目镜上的透镜旋下，然后将目镜测微尺的刻度朝
　下轻轻地装入接目镜的隔板上，然后把镜台测微尺置于载
　物台上，使刻度朝上并对准聚光器。先用低倍镜观察，对
　准焦距，当看清镜台测微尺后，转动接目镜，使目镜测微
　尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使目镜
　测微尺Ｏ点与镜台测微尺的一条刻线重合，然后于另一端
　找重合线，计算两端重合线之间目镜测微尺和镜台测微尺
　各载若干格。因为镜台测微尺的刻度是在载物台上，所以
　每格的长度(10微米)就是实际测量时的长度。
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