高效液相色谱法(11).ppt

高效液相色谱法
High Performance Liquid Chromatography
HPLC
第十一章
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主要内容
11-1 概述
11-2 基本理论
11-3 高效液相色谱分离方法
11-4 高效液相色谱仪
11-5 高效液相色谱应用
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§11-1 概述
 高效液相色谱法与经典液相色谱法
经典液相柱色谱装置
高效液相色谱仪
经典液相色谱
HPLC
固定相粒径
流动相驱动方式
流动相流速
150-200 μm
重力或低压泵
很慢
3-10 μm
高压泵
快(1-10mL/min)
例：分离20种氨基酸
柱长：170 cm
柱径： cm
F：30 mL/h
t分离: >20 h
经典柱色谱
HPLC
t分离：1 h
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§11-2 基本理论
一、色谱柱柱效的基本关系式
二、分离度
GC基本理论（塔板、速率）也适合于LC
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三、速率方程
溶质在液相流动相中的扩散系数，约为气相中扩散系数的万分之一
A涡流扩散项
B/u分子扩散项
Cu传质阻力项
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流动相流速对板高的影响
小颗粒填料，填充均匀；
选择较低的流动相流速；
选择粘度小的溶剂作流动相，改善传质。
修正的速率方程：
提高柱效途径
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§11-3 高效液相色谱分离方法
一、吸附色谱法（液固吸附色谱LSC）

Kad值越大，保留时间越长
吸附平衡常数
吸附竞争
X：组分分子
S：流动相分子
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硅胶－强极性
氧化铝－弱极性
活性炭－非极性
分子筛－强极性
高分子多孔微球(GDX)
固体吸附剂
应用最广
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硅胶表面结构
弱酸性，对碱性化合物强保留，拖尾
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硅胶表面结构经热处理发生的变化
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