山大微生物实验报告——霉菌的形态观察.doc

霉菌的形态观察作者:喻曙光学号: 班级:生院 2010 级生命基地生北周五第四组同组者:。。。。。。。。。【实验目的】 1 、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法 2 、了解四类常见霉菌(曲霉、毛霉、青霉、根霉)的基本形态特征【实验原理】霉菌霉菌可产生复什分枝的菌丝体, 分基内菌丝和气生菌丝, 气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝, 由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体( 尤其是繁殖菌丝) 及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多(约 3~ 10μm ),常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍,因此,用低倍显微镜即可观察。观察方法观察霉菌的形态有多种方法, 常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法,本次实验采用载玻片培养观察法(小室培养法)。载玻片培养观察法(小室培养法) 用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上, 接种后盖上盖玻片培养, 霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后, 将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态,还便于观察不同发育期的培养物。【实验器材】 1. 菌种: 曲霉( Aspergillus sp. ), 青霉, 根霉( Rhizopus sp. ), 毛霉( Mucor sp. ),培养 7d 的马铃薯琼脂平板培养物 2. 培养基:马铃薯培养基(简称 PDA )(配方见附表) 3. 仪器或其他用具:平皿,载玻片,盖玻片,无菌吸管, U 型玻棒,解剖刀,镊子, 50% 乙醇, 20% 甘油,显微镜,接种环,酒精灯等【实验步骤】 1. 载玻片培养观察法(小室培养法) (1). 培养小室的灭菌: 在平皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片, 再放一 U 形玻棒, 其上放一洁净载玻片和两块盖玻片,盖上皿盖,包扎后于 110 ℃灭菌 20~ 30 分钟,烘干备用。(2). 琼脂薄片的制作: 取已灭菌的马铃薯琼脂培养基各 6~ 7ml 注入另两个灭菌平皿中, 使之凝固成薄层。通过无菌操作,用解剖刀将其切成 1cm x 1cm 的琼脂块,并将其移至上述培养室中的载玻片上(每片放两块)。(3). 接种: 通过无菌操作, 用接种环从斜面培养物上挑取很少量的孢子, 接种于培养小室中琼脂块的边缘上,用无菌镊子将盖玻片覆盖在琼脂块上。(4). 培养: 通过无菌操作, 在培养小室中的圆滤纸上加 2~ 3ml 灭菌的 20% 的甘油( 用于保持平皿内的湿度) ,盖上皿盖, 27℃正置培养一周。(5). 镜检: 根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置低倍镜下观察, 必要时换高倍镜。【实验结果与分析】表(一)四种霉菌形态特征表菌种根霉毛霉曲霉青霉形态特征菌丝无隔、多核、分枝状,有匍匐菌丝和假根。在假根的上方直立地生长出一至数根孢囊梗, 其顶端膨大成球形孢子囊。囊的基部有囊托, 中间有球形或半球形囊轴。囊内产大量孢囊孢子, 有性生殖时由不同性别的菌丝或匍匐菌丝上生出配子囊, 配子囊双双异宗配合形成一接合孢子。菌丝无隔、多核、分枝状,无假根或匍匐菌丝。菌丝体上直接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的孢囊梗。各分枝顶端着生球形孢子囊,无囊托。营养菌丝具有分隔; 气生菌丝的一部分形成长而粗糙的分生孢子梗, 顶端膨大成球状顶囊, 表面辐射出一层或两层小梗, 小梗上