浅议植物细胞凋亡(论文).doc浅议植物细胞凋亡
姓名:刘文娜班级:财管1013班学号:20101554
摘要:细胞凋亡是多细胞生物体在生理或病理条件下部分细胞所采取的一种由内在基因编程调节, 通过主动的生化过程而自杀死亡的方式⑴。由于细胞凋亡受到严格的由遗传机制决定的程序性调控, 所以常常又称为细胞编程性死亡,是植物正常发育中必不可少的一部分。本文对植物凋亡的一般特 征、植物营养和生殖生长中的细胞凋亡以及植物-病原物互作中的细胞凋亡进行了综合评述,并对植 物细胞凋亡研究的现实意义进行了探讨。
关键词:植物细胞凋亡研究展望
引言 细胞凋亡的现象最早是Kree在1965年观察到的,经过进一步深入研究,他于1972年将其重 新命名为细胞凋亡。之后近20年,细胞凋亡的研究主要集中在动物,人们越来越认识到细胞调亡在 维持动物体内细胞和组织平衡、特化、形态建成和防病、抗病过程中的重要作用。但由于植物生长 发育和细胞结构的特殊性,有关植物细胞凋亡的研究起步较晚。近年来,随着植物细胞凋亡的研究 进展,人们逐渐认识到细胞凋亡是高等植物生长发育的必要组成部分,同时也是植物体度过不良环 境的重要手段。目前,植物细胞凋亡的研究已成为近年来植物细胞生物学的新兴研究领域和热点之 一。本文就植物细胞凋亡的一般特征、检测方法、在植物中的存在及意义作一综合阐述。
1植物细胞凋亡的一般特征
经历细胞凋亡过程的细胞呈现一些典型的形态学变化,光学显微镜或电子显微镜观察可见:细胞 体积缩小,染色质凝集、断裂、趋边化,细胞器解体、消失,细胞膜发泡形成凋亡小体。随着研究的深 入,分子生物学证据也逐步被阐明:细胞染色质DNA在核小体连接部位断裂,其片段大小为200bp的倍 数,经琼脂糖凝胶电泳可见到特征性的DNA梯度,此特征还可以通过超速离心、末端标记电泳以及原 位缺口翻译技术等进行定性、定量测定。细胞形态学和分子生物学的变化是细胞凋亡的重要诊断依 据。
2细胞凋亡的检测方法
电子显微镜。电镜观察,凋亡细胞染色质固缩,常聚集于核膜上呈境界分明的块状或新月形小 体,初期细胞可见完整的细胞器,细胞膜完整,凋亡小体形成。目前一致认为,电镜下获得凋亡细胞特 征性的形态学改变是判断细胞凋亡的最可靠依据。
荧光显微镜。。 常用荧光色素有叮唳橙、Hoech st 33258或Hoech st 33342>碘化丙唳(PI)、澳乙锭(EB)。前两种可 分别进入活细胞和死细胞
,而后两种荧光素仅能进入死细胞。不同的荧光素使核着染不同颜色的荧 光,正常细胞呈均匀荧光染色,而凋亡细胞呈致密浓染的颗粒状或块状荧光。
:染料排斥法。
除了电镜能反映细胞膜完整性外,还可用染料排斥法,如台盼蓝、PI等。坏死细胞膜破损,被染 料着染。而凋亡细胞细胞膜完整,不被着染。但在体外培养的细胞最终也会发生继发性坏死。因此,此 法不能单独用来判断凋亡细胞。另一种方法是判断胞质膜的不对称性。在正常细胞膜上,磷脂酰丝氨 酸基团(PS)位于胞内侧,而在细胞凋亡早期膜上此基团则转向胞外侧,以利于被吞噬。因此,磷脂酰丝 氨酸基团位置的改变,可作为凋亡细胞的一个标志。
(1)琼脂糖凝胶电泳法。
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