依达拉奉对异位心脏移植氧自由基损伤影响.pdf

目录中文摘要????_?????????????????????1 英文摘要??????????????????????????4 研究论文依达拉奉对异位心脏移植术心肌损伤的影响前言??????????????????????????.99 日lJ看??????.???..?...?.??.?.????.???..?. 材料与方法???????????????????????9 结果??????????????????????????14 附图??????????????????????????16 附表??????????????????????????24 讨论??????????????????????????27 参考文献????????????????????????34 综述依达拉奉对心脏移植缺血再灌注损伤的作用?????????38 致{射??????????????????????????5 1 个人简历??????????????????????????52 中文摘要依达拉奉对异位心脏移植术心肌损伤的影响摘要目的:.本实验通过改良Heron法建立大鼠颈部心脏移植模型,观察不同时期依达拉奉对心脏组织学、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、线粒体ATP酶活性、血清肌酸激酶同工酶(CK小m) 活性及肌钙蛋白(cTnI)含量的影响,拟探讨其对同种异位心脏移植术心肌损伤的作用及机制,为临床用药提供实验依据。方法:将清洁级健康雌性SD大鼠60只,随机分成3组,每组20只: A组为假手术组,B组为模型对照组,C组为依达拉奉组。采用改良Heron法建立同种异位心脏移植模型:(1)受体大鼠颈部准备:麻醉成功后仰卧位固定,颈部备皮、消毒。自下颌基底部至胸骨上缘锁骨处做颈前右外侧切口,逐层分离出颈外静脉,尽可能长地游离该血管, 剥离表面脂肪组织,分支结扎剪断;离断胸锁乳突肌,于气管右侧可见颈动脉鞘,游离颈总动脉。(2)供体心脏的摘取:供体大鼠麻醉、固定、备皮及消毒同受体大鼠,舌静脉注入肝素盐水1000 U/kg,正中切口开胸,提起剑突,沿两侧腋前线自肋弓剪至锁骨,向上翻起前胸廓,胸腔内置冰盐水,打开心包,分离主肺动脉窗,剪断腹主动脉及下腔静脉放血的同时, 阻断升主动脉,于无名动脉起始处置管,5-0细丝线环扎固定,灌注4。C 改良Thomas停跳液6~7 m1,灌注压约为75 mmHg,可见心脏迅速停跳、松弛、变白,5-0细丝线结扎后剪断右前、后腔静脉。于升主动脉与肺动脉后方,,将肺静脉、左前腔静脉集束结扎。左肺动脉置管,。无名动脉根部剪断升主动脉,提起心脏,于集束结扎远心端剪断集束及左、右肺动脉,摘下心脏置入4℃改良Thomas停跳液中,挤压心腔, 可见积血从主动脉及左肺动脉口逸出。(3)心脏移植:结扎受体大鼠颈外静脉和颈总动脉远心端,近心端微血管夹夹闭,将供体心脏置入受体右颈部切口处,将供心右肺动脉套管插入受体颈外静脉,用预置好的5一O细丝线环扎之;同样方法供心主动脉套管插入受体颈总动脉腔内并环扎固定,移去微血管夹开放静脉,然后间断开放颈总动脉微血管夹,供心恢复灌注,{耋中文摘要可见供心立即充血、转红,复跳后再移去微血管夹。(4)吻合切口:心脏复跳后,尽量让颈总动脉套管缩回颈动脉鞘内,心脏置于颈部最适合位置, 观察15"--'25rain,心脏跳动良好,无回流障碍、无出血等,逐层缝合受体切口。移植后复跳的供心颜色红润,收缩有力,律齐, 次/min,吻合口无漏血,心耳无过度充盈,表示移植手术成功。 A组做颈前右外侧切口,游离颈外静脉和颈总动脉,一小时后吻合切口。B组结扎颈外静脉远心端后,近心端注射生理盐水。C组结扎颈外静脉远心端后,近心端lmg/ml依达拉奉生理盐水注射。再灌注6小时右侧颈外静脉取血lml,测定血清SOD活性及MDA含量。再灌注24小时取血4"---'5ml,测定血清CK-MB活性、血清cTnI含量、血清SOD活性及 MDA含量。取血完毕处死立即取心肌组织,+.ATP酶、Ca2+.ATP酶活性的变化;另一部分用于制备光、电镜。结果:各组补齐10只大鼠进入结果分析 1光镜观察: A组大鼠心肌着色均匀完整,可见横纹清晰,未见炎性细胞浸润。B 组心肌细胞着色不均,横纹模糊不清,间质充血、水肿明显,血管扩张, 可见炎性细胞浸润,偶见心肌细胞变性坏死。C组心肌细胞着色不均,轻度水肿,可见横纹,间质稍水肿,血管轻度扩张,可见红细胞散在心肌细胞间,较A组重大,较B组损伤轻。 2电镜观察: A组:正常心肌超微结构。心肌细胞无肿胀,胞膜完整;线粒体无肿胀,嵴完整,基质清晰;肌原纤