实验五、培养基制备、消毒灭菌及微生物接种技术.ppt

实验五培养基的制备、消毒灭菌及微生物接种技术
实验目的和要求:
了解配制培养基的原理,并掌握配制培养基的一般方法和步骤;
了解高压蒸汽灭菌的原理,并掌握其具体操作方法。
培养基
培养基(medium):由人工配制的适合微生物生长、繁殖或适合积累代谢产物的营养基质。
用途:
菌种分离、培养和分类鉴定;
菌种保藏;
生理生化性质的研究;
发酵生产
按培养基的物理状态
固体培养基
固体状,~2%琼脂配制而成
分离、鉴定、计数、保藏等
半固体培养基
柔软的浆糨状,~%琼脂配制而成
观察微生物的运动、分类鉴定及噬菌体效价测定等
液体培养基
液体状,未加任何凝固剂
工业大规模发酵生产及实验室生理、遗传等基础理论研究
培养基的种类及其应用
培养基的配制过程
计算用量
称量
溶解
调pH
过滤
分装:
试管:固体:1/5试管;液体:1/4-1/5。
三角瓶:1/3-1/2
包扎
灭菌:
一般培养基, 121 0C, 15-30min;
含糖培养基: 112 0C, 15-30min;
易产生沉淀的物质:分别灭菌后再混合
摆斜面(固体,试管)
无菌检查
消毒与灭菌
干热灭菌:恒温干燥箱:160 0C
高压蒸汽灭菌
紫外线灭菌
过滤除菌
具体安排
组
培养基名称
数量(ml)
分装配方
8
牛肉膏蛋白胨培养基(固体)
250
40支试管 p150-1
7
牛肉膏蛋白胨培养基(固体)
800
2个三角瓶(1000ml ) p150-1
6
高氏1号培养基(固体)
800
2个三角瓶(1000ml ) p150-2
5
PDA(固体)
800
2个三角瓶(1000ml ) p150-4
4
淀粉培养基(固体)
200
1个三角瓶 p154-142
3
依红-美蓝培养基
800
2个三角瓶(1000ml ) p152-26
2
糖发酵培养基
200
20支试管 p151-10
1
葡萄糖蛋白胨水培养基
200
40支试管 p150-8
无菌培养皿15套
无菌移液管5支
(三角瓶装,带玻璃珠)
土壤样品
烂水果1只
每组另须准备如下用品
实验报告
P4:六;七(2)
P10: 七(1,2)
谢谢!