兴安落叶松胚性愈伤组织诱导研究.pdf

东北林业大学
硕士学位论文
兴安落叶松胚性愈伤组织诱导研究
姓名:赵晓敏
申请学位级别:硕士
专业:森林培育
指导教师:沈海龙
20070601
摘要俏夜ū钡厍饕5脑炝质髦郑昀炊云溆帕贾源的需求逐渐增大。而由于其结实量不稳定且种子具有休眠特性,难以满足目前的生产需求。因此,本研究以成熟和未成熟合子胚为材料,系统研究了兴安落叶松胚性愈伤组织诱导的影响因素,以期确立高效、稳定的兴安落叶松胚性细胞系,并为其体胚发生体系的建立提供实验依据。主要结果如下:猿墒旌献优呶2牧系挠盏脊讨蟹⑾郑衷础⑴嘌嘈汀⒓に刂掷唷⒌臀源诱导率显著高于加格达奇种源的诱导率,嘌庞贛及其它几种培养基,.挠盏甲饔迷洞笥贜,经过低温处理℃,鲈的成熟种子以及带胚乳培养都有利于诱导。闯墒旌献优叩呐咝杂俗橹盏加胪庵蔡宀杉氖奔涔叵得芮小T月中上旬取材的外植体诱导率为欢月下旬~律涎〔牡耐庵蔡即,处于前子叶期、子叶初期咝杂俗橹钠骄盏悸矢.%,.%遗咝杂俗橹态好,孪卵院笏孀藕献优叻⒂鸾コ墒欤咝杂俗橹挠盏悸拭飨韵陆怠煌に刈楹虾团ǘ扰浔榷耘咝杂俗橹盏悸视跋觳煌液献优卟煌⒂时期受激素作用的程度也不相同,处于胚胎选择时期的外植体,无论激素浓度是多少,胚性愈伤组织诱导率都是白右镀谂咴趌时达到最高的诱导率。。此外,当琼脂浓度为保咝杂俗橹的诱导率最高。≡窈鲜实募檀奔涠耘咝杂俗橹脑鲋秤跋煲步洗螅庇俗橹嘌保檀谇碇ǘ任的培养基中效果较好,时间过长可能使胚性愈伤组织失去胚性而不能进一步生长发育。增殖阶段仍就需要一定量的激素,首次继代培养在时效果最好,增长量可以达到蠹に嘏ǘ冉档椭猎吹牡氖种弧H糁苯幼=拥轿藜に氐呐嘌校庵体将褐化死亡。墒炫嘌屑尤胧柿颗ǘ鹊腁·咝杂俗橹突岱只鲋状后期原胚。添加适量的⒓〈家部梢云鸬酱俳只淖饔茫翘迮叩纳ぷ刺不好,也没有分化出子叶胚;蚉合用,无明显效果。将子叶形胚转移到不含任何激素的萌发培养基~螅右队苫瓢咨1湮B躺ǎ抑鸾フ趴#屡轴伸长,但生根情况不好。关键词兴安落叶松;体细胞胚发生;胚性愈伤组织;合子胚兴安落叶松处理以及带胚乳与否,都对兴安落叶松胚性愈伤组织的诱导产生了明显的影响。内蒙种添加和··ā..·..~、
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聊签名姚渔疵学位论文作者签名:基妇学位论文作者签名:蕴触救签字日期:竽暾荚隆篋曰签字日期:矽晟禄学位论文版权使用授权书签字日期:≯矿晗缭乱腋独创性声明人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得蠡韭鲞些盘鲎或其他教育盔韭盐些盘鲎阅和借阅。本人授权盎些盎些盘鲎可以将学位论文的全部或部分内容编入有本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研气成果。据我所知,除了文中特以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文作者完全了解有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论C艿难宦畚脑诮饷芎笫视帽臼谌ㄊ学位论文作者毕业后去向:工作单位:通讯地址:邮编:文。电话:
⑸难芯扛趴是指二倍体或单倍体的体细胞在特定条件下,未经性细胞融合而通过与合子胚胎发生类似的途径,发育出新个体的形态发生过程L逑赴呤怯傻ハ赴蚺咝韵赴欧只偕仓甑囊糯榷ㄐ越细撸胚性培养物可以进行长期保存,成为遗传转化的良好受体,可在短时问内获得品质优良的茁木。成熟的体细胞胚诱导技术有繁殖效率高、繁殖系数大,不受自然条件制约等优点。例如,在胡萝∨嘌校桓雠嘌磕诳刹蚋雠咦刺澹幻靠塑俎R侗外植体可获得万个胚状体:餐粕悬浮细胞培养液苣诳刹生龈咧柿康淖右杜摺灰虼耍逑赴咛シ⑸际跻阎鸾ゾ晌V参景,同时体细胞胚发生在人工种子、种质资源保存、体细胞杂交、单倍体和三倍体等植株的诱导培养、突变体的诱变和筛选、植物基因工程等许多方面也存在着巨大的经济价值,也为植物胚胎发生机理与遗传转化等的研究提供了重要的模式系统。蚏几乎同时发现,胡萝谧橹培养的条件下,根细胞产生一种与胚相似的结构,并观察到由这种结构长成完整的植株,这为德国植物学家提出的植物细胞具有全能性提供了充分的理论依据。此后,植物学家对这一领域作了大量的研究并取得了可喜的成果,世纪年代,曼陀罗花粉获得单倍体植株,年代,烟草原生质体培养也获得完整植株,木本植物中首次从甜橙愈伤组织制备的原生质体再生植株获得成功】。体细胞胚发生的研究中迄今已在科属嘀种参镏斜ǖ懒颂迮叻⑸浚渲心颈局参镆