超高效液相色谱(uplc).ppt

超高效液相色谱超高效液相色谱 1目录绪论 1理论基础 2仪器介绍 3应用和展望 4 ACQUITY UPLC TM系统 3 超高效液相色谱的发展站在当今世界科技前沿的液相色谱用户现在又有了新的需求。首先是改进生产力的需求,因为大量的样品需要在很短的时间内完成;其次是在生化样品及天然产物样品的分析中,样品的复杂性对分离能力提出了更高的要求;第三是在与质谱等检测技术联用时, 也提出了更高的要求。由此, UPLC (超高效液相色谱)概念得以提出,将 HPLC 的极限作为自己的起点。 4 液相色谱 40 年的发展史是颗粒技术的发展史。颗粒度的改变直接影响到柱效,从而对分离结果产生直接影响。由下图可知:随着颗粒度的不断降低,色谱分离度不断提高。 5 基于 μm小颗粒技术的 UPLC TM,并非普通 HPLC 系统改进而成。它不但需要耐压、稳定的小颗粒填料,而且需要耐压的色谱系统(>15,000psi) 、最低交叉污染的快速进样器、快速检测器及优化的系统体积等诸多方面的保障,以充分发挥小颗粒技术优势。这就需要对系统所有硬件和软件的进行全面创新。 6 ?在高效液相色谱速率理论中, Van Deemter 方程式的简化表达式: ?如果仅考虑固定相的粒度对的影响,其简化方程式可表达为: 78 超高分离度 Rs=( N4 )( α- 1α) k 2(k 2+1 ) L dp ∝ N1随着 dp 的降低, N值会增加;而 N值增加,则 Rs 值增加 ACQUITY UPLC TM 系统: μm 颗粒提供的柱效比 5 μm 颗粒提高了 3 倍。 μm颗粒的分离度比 5 μm颗粒提高了 70 %。 9 UPLC TM与 HPLC :分离度比较 UPLC TM用 μm 颗粒提高了分离能力, 可以分离出更多的色谱峰,从而对样品提供的信息达到了一个新的水平。 10