《QCT-509-1999-汽车柴油机喷油泵柱塞偶件 技术条件》.pdf.pdf

b—l 1B6· 豸撅吝酸听垡髓券系。反义寡核苷酸抗乙型肝炎病毒研究进展D 钟森王升启综述乙型病毒性肝炎的抗病毒治疗是清除乙型肝炎病毒(HBv)感染的一个重要措施。近年来分子生物学和分子病毒学的迅猛发展,使抗HBv治疗进入了分子水平的研究阶段。通过多学科的合作,可望在不久的将来,探索出有效的抗HBv新途径。最近,一种新型的抗HBV基因治疗方法一反义寡核苷酸(asON)疗法,受到了国内外学者的普遍关注。该疗法是根据碱基配对原则,设计与 HBV基因序列互补的寡核苷酸(ON)片段,即asON,经人工合成手段制备出各种不同的asON及其衍生物,使其特异性地与病毒RNA或DNA杂交,从而封闭或阻断 HBV的复制和表达。本文就近年来有关asON抗HBV 研究现状、存在问题和发展方向作垛述。: (一)抑制转录: 采用修饰的并且有良好杂交性能的互补ON与HBVDNA单链区结台,可以干扰转录过程。单链区结构可见于转录复台物形成后部分双链解链形成的单链区(即位于细胞RNA多聚酶Ⅱ和DNA的结台点)以及病毒基因的环状双链结构中本身存在的部分单链区。(二)抑制反转录: 反转录是一个广为重视的抗 HBV作用位点,因为目前对此过程已有比较详尽的认识。,它只对前基因组mRNA进行包装,而不涉及亚基因组mRNA和非病毒的RNA。由于核衣壳装配的序列决定区已经明确,因此可以设计asON阻断装配过程; 此外,设计与前基因组mRNA互补的脱氧ON(ODN)可诱导RNaseH对前基因组mRNA的切割,从而抑制反转录过程。(三)抑制翻译: asON与各类HBV转录物的翻译起始部位结合可直接抑制翻译过程:与其它部位的结台可阻断核糖体沿mRNA链的移动。目前几乎所有的 。(四)抑制基因功能区和高度保守区的功能在S 区、P区、前C区、C区和x区设计的与病毒mRNA互补的ON可抑制基因区相应编碍蛋白的生产:根据复制过『2f^、/2 620一张定凤王玉芝审校,{z\’程中的顺式作用成分(DR1、DR2和u5样序列)及调节成分(启动子、增强子、PolyA增加信号序列糖皮质激素反应成分等)设计的asON也可能对基因表达产生不同程度的抑制作用;病毒基因中的高度保守区,如u5样序列等, 也是asON攻击的较好位点。二、asON抗HBV研究现状目前,asON抑制HBV复制和表达的研究仅限于细· 胞培养系统中的观察。Blum等n用一种人类肝癌细胞系(Huh一7)研究了asON抗HBV作用。实验共分为3 组,;第二组用asON(ATC-40)与HBVDNA共染Huh一7细胞: 第三组用同等长度的有意义(SenSe)ON(GAT一40)与 HBVDNA共染Huh-7细胞。随后用放射免疫法检测培养液中},持续5天。结果发现,第一组转染细胞能合成并分泌 ~sAg和}ⅡjeAg分泌, 第三组对HBV抗原分泌未产生阻断作用。 抗HBV