实验5微生物大小及量测定.ppt

实验五　微生物大小及数量测定
微生物学实验
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课前提问与目的要求
【课前提问】
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【目的要求】
1. 学习并掌握使用显微测微尺测定微生物大小的方法。
2. 掌握对不同形态细菌细胞大小测定的分类学基本要求，增强对微生物细胞大小的感性认识。
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【基本原理】
微生物细胞的大小是微生物的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。其测量工具有目镜测微尺和镜台测微尺。镜台测微尺是中央部分刻标准刻尺的载玻片，其尺度总长为1mm，精确分为10个大格，每个大格又分为10个小格，共100小格，，即10μm。
图5-1 镜台测微尺中央部分及镜台测微尺校正目镜测微尺
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目镜测微尺是一块可放入接目镜内的圆形小玻片，其中央有精确的等分刻度，一般有等分为50小格和100小格两种。测量时，需将其放在接目镜中的隔板上，用以测量经显微放大后的细胞物象。由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同，目镜测微尺每小格在不同条件下所代表的实际长度也不一样。
【基本原理】
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【实验用品】
：金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和迂回螺菌的染色玻片标本。
：香柏油，二甲苯。
：镜台测微尺，目镜测微尺，普通光学显微镜，擦镜纸等。
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【方法步骤】
目镜测微尺的安装
校正目镜测微尺
菌体大小的测定
测定完毕
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1）使用镜台测微尺进行校正时，若一时无法直接找到测微尺，可先对刻尺外的圆圈线进行准焦后再通过移动标本推进器进行寻找。
2）细菌个体微小，在进行细胞大小测定时一般应尽量使用油镜，以减少误差。
3）细菌在不同的生长时期细胞大小有时会有较大变化，若需自己制样进行细菌细胞大小测定时，应注意选择处于对数生长期的菌体细胞材料。
获得本实验成功的关键
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【注意事项】
、很薄，在取放时应特别注意防止使其跌落而损坏。
，否则难以找到镜台测微尺的刻度；换高倍镜和油镜校正时，务必十分细心，防止接物镜压坏镜台测微尺和损坏镜头。
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【实验报告】
1. 结果
1）将目镜测微尺校正结果填入表5-1中
表5-1 目镜测微尺校正结果
物镜
物镜倍数
目镜测微尺格数
镜台测微尺格数
目镜测微尺每格代表的长度/μm
低倍镜
高倍镜
油镜
目镜放大倍数：
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2）将各菌测定结果记录填入表5-2中。
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平均值(μm)
金黄色葡萄球菌
枯草芽孢杆菌
迂回螺旋菌
注：球菌用直径（宽度）表示细胞大小，杆菌和螺菌用宽度×长度表示细胞大小。
表5-2 金黄色葡萄球菌大小测定记录
【实验报告】
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