实验五 白细胞分类计数
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一、实验目的
掌握显微镜外周血白细胞分类计数(DLC)的方法;
掌握外周血各类白细胞的正常形态。
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二、实验原理
将血液制成细胞分布均匀的血涂片,用瑞氏染液染色,根据各类细胞的形态特点和颜色差异将白细胞区别并进行计数。通常计数100个白细胞,计算得出各种白细胞所占的百分率。
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三、实验器材与试剂
器材: 显微镜,香柏油,擦镜纸,清洁液
试剂:Wright 染液。
四、实验标本:制备良好的血涂片
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五、操作步骤
:按照正确的操作方法制备血涂片
:用Wright染液对血涂片染色,冲洗干净,自然干燥后备用 。
:低倍镜下观察全片,包括白细胞飞分布和染色情况。
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:选择血涂片体尾交界处细胞分布均匀、着色良好的区域,滴加1滴香柏油,按一定的方向顺序对所见到的每个白细胞进行分类,并用白细胞分类计数器做好记录,共计数100个白细胞。
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:求出各类白细胞所占的百分率。
: 百分率(%)。
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六、参考区间
WBC 百分率 (%) 绝对值( ×109/L )
中性杆Nst 1~5 ~
中性分Nsg 50~70 ~
嗜酸性 E ~5 ~
嗜碱性B 0~1 0~
淋巴 L 20~40 ~
单核M 3~8 ~
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七、注意事项
:以体尾交界处最佳。
:遵循一定的方向,以“城垛式”连续进行,避免主观选择视野;结果的记录可采用计数器、手工画“正”字或“+++++”。
:白细胞总数在(~)×109/L之间者,分类计数100个白细胞;×109/L以上时,计数200个;×109/L时,应选用两张血涂片计数50~100个白细胞。
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:用各类白细胞的百分率乘以白细胞总数,即可求得每升血液中各类白细胞数量的绝对值。
,应逐个计数,但不计入100个白细胞内,以分类100个白细胞过程中见到的有核红细胞个数来报告,并注明其所属阶段。
、血小板的形态、染色及其分布情况,注意有无寄生虫(如疟原虫)及其他异常所见。
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