会计学
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细菌的培养与分离技术
常用玻璃器材的准备
玻璃器材的种类及用途
玻璃器材的清洗
★新购置的玻璃器材：1％～2％盐酸浸泡－→清水清洗
★用过的无污染器皿：洗涤剂洗刷－→清水清洗
细菌污染的器材：消毒灭菌后再洗刷
★盛培养基试管和平皿：高压灭菌－→趁热倒出－→洗涤剂洗刷－→清水冲洗
★吸管：3％来苏浸泡－→清水冲洗
★玻片和盖玻片：3％来苏和清洁液浸泡－→清水冲洗；染色后的玻片，应肥皂水煮沸10min再洗涤
★含油脂的器皿：单独灭菌
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玻璃器皿灭菌前的准备
玻璃器皿在清洗、干燥后必须经正确的包裹和加塞后才能进行灭菌处理。
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培养基的成分和作用
培养基：是指人工配制的适合细菌生长繁殖的综合营养基质。
营养物质：蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖醇类、血液、鸡蛋和动物血清、生长因子、无机盐类
水
凝固剂：琼脂、明胶
抑制剂
指示剂
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培养基的种类（按用途分类）
基础培养基：培养营养要求不高的细菌，如普通平板
营养培养基：能满足营养需求较高细菌的生长，如血平板
鉴别培养基：含有某些特定的底物，用于鉴别细菌，如克氏双糖培养基（KIA）
选择培养基：具有选择性抑制作用，用于选择性的培养目的菌，如SS平板
增菌培养基：促进目的菌的生长，适用于含菌量较少的标本，如葡萄糖肉汤。
厌氧培养基：用于培养厌氧菌
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培养基的种类（按物理性状分类）
液体培养基：不含凝固剂，用于增菌和接种纯种细菌。
半固体培养基：％～％琼脂，用于观察细菌的动力。
固体培养基：含2％～％琼脂，多用于细菌的分离培养。
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培养基制备的一般程序
调配
溶化
矫正pH
过滤澄清
分装
灭菌
检定
培养基灭菌
★ 基础培养基：121℃高压蒸汽灭菌15分钟
★ 含糖培养基：113 ℃灭菌15分钟
★ 鸡蛋、血清培养基：间歇灭菌3天3次
★ 不耐高温的液体成分：滤过除菌
保存
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培养基pH测定及矫正
材料：
待测培养基、
、4孔比色架、％酚红、
、1mol/L）
盐酸（、1mol/L）
蒸馏水
试管（与比色管口径一致）、
刻度吸管（5ml、1ml、、）、
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pH矫正
水
培养基
培养基
比色管
酚红
指示剂
目 视
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培养基
蒸馏水
pH矫正
过酸
相同
过碱
标准比色管
待测管
培养基
蒸馏水
标准比色管
待测管
培养基
蒸馏水
标准比色管
待测管
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