磁性免疫层析技术在氯霉素残留快速检测中应用研究.pdf

分类号学号 M201071510
学校代码 10487 密级





硕士学位论文




磁性免疫层析技术在氯霉素残留快
速检测中的应用研究








学位申请人: 黄薇
学科专业: 制药工程
指导教师: 杨海讲师
答辩日期: 2012 年 05 月 17 日
A Thesis Submitted in Partial Fulfillment of the Requirements
for the Degree of Master of Science



Development of ic Lateral Flow Immunoassays
for Rapid Detection of Chloramphenicol Residues




Candidate : Huang Wei
Major : Pharmaceutical Engineering
Supervisor : Dr. Yang Hai





Huazhong University of Science & Technology
Wuhan 430074,
May 2012
独创性声明

本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得
的研究成果。尽我所知,除文中已经标明引用的内容外,本论文不包含任何其他
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均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。


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日期: 年月日




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日期: 年月日日期: 年月日
华中科技大学硕士学位论文
摘要
在食品安全事故频发的今天,食品安全问题更加受到人们的关注,同时也对食
品安全检测技术提出了更高的要求。
氯霉素(Chloramphenicol,CAP)作为一种广谱抗生素,因其价廉高效,曾作
为药物应用于人和动物细菌性疾病的治疗,并作为饲料添加剂广泛应用于畜牧业、
水产业。现已证明,氯霉素对机体有很大的毒副作用,因此世界上许多国家明令禁
止将此药用于可食用性动物。欧盟对氯霉素的检测限由原来的 10μg/kg 降至 ,
比原标准要求提高了 100 倍;美国 FDA 规定的检出限也由原来的 5μg/kg 降为了
。为了严格监控氯霉素的使用,抑制氯霉素引起的食品安全问题的发生,建
立高效、灵敏、经济的氯霉素残留分析方法很有必要。
磁性免疫层析法(ic lateral flow immunoassays,MLFIAs)作为快速检测
方法的新秀,以超顺磁性微球代替传统的胶体金作为信号标记物,即可以通过肉眼
观察或光学比色法实现快速定性分析,又可以进一步利用超顺磁材料特殊的磁信号
实现免疫层析技术的定量化检测。
本论文考查了几种不同来源的超顺磁性纳米微球,筛选了适用于免疫层析分析
的磁球,研究优化了磁性免疫层析条件,建立了一种将免疫磁分离与免疫磁层析相
结合的磁性免疫层析快速检测新方法,并将其用于氯霉素残留的快速检测。
主要研究内容包括:
1) 筛选出适合进行磁性免疫层析的磁性纳米粒:主要对 8 种不同来源超顺磁性
微球的性能进行了对比,选择出了适合进行磁性免疫层析的磁球 A 和磁球
D。
2) 优化了磁微粒免疫层析条件:比较了磁球 A 和磁球 D 在不同盐浓度和 pH 下
的性能差异。研究了不同上样缓冲液配方对磁球展层的影响,发现表面活
性剂和高浓度蛋白对于磁球的展层具有明显促进作用,磁球 A 在 %以
上的 Tween20 中就可以完全展层,在 5%以上的 BSA 中就可以部分展层,
后使用含 5% BSA 和 1% Tween20 的 PBS 作为上样缓冲液。研究了干
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