NOD2CARD15基因突变与中国人克罗恩病相关性研究.pdf

南方医科大学
硕士学位论文
NOD2/CARD15基因突变与中国人克罗恩病相关性研究
姓名:龙靖华
申请学位级别:硕士
专业:内科学(消化系病)
指导教师:智发朝
20070510
克罗恩病相关性研究蛲槐溆胫泄/硕士研究生:龙靖华指导教师:智发朝教授摘要背景、目的克罗恩病’珻是炎症性肠病囊桓鲋饕@嘈停是一种累及全层节段性肠道的非特异性炎症。在亚洲的发病率远低于西方国家,近年来该病的发生有上升趋势,在中国的发病率也有上升趋势。的病因及发病机制并不明确,临床表现也复杂多样,且容易误诊,复发率高。近年来的观点认为,携带遗传易感基因的宿主在环境因素参与下,免疫功能紊乱,最终导致疾病发生。研究发现/基因序列单核苷酸多态性琒隿飨韵喙兀⑾植⒅な灯渖嫌个珿,/基因突变与发病年龄、病变部位及临床特征有关。上述现象在德国、澳大利亚及英国等人群中均得到验证,但在日本、我国香港和浙江地区的小样本研究并未发现上述鯯的改变。本课题组前期对例患者基因第及对外显子测序分析也没有发现上述鯯崾驹诎字秩酥杏易感相关的鯯赡苡攵ǚ饺宋薰兀捶⑾諲疌蛄硗庖个突变点赡苡胫泄薱喙兀鼵∪酥杏例存在着蛋白能对细菌成分产生反应,激活核转录因子。蛋白结构为个串联重复序列,中间龊塑账峤岷锨和烁缓涟彼岬闹馗硕士学位论文肱访腊字秩薈灾喙兀⑶胰衔变,
方法:别多种分子如蛋白、肽、碳氢化合物等功能的重复序列,可识别微生物产物的不酸序列和长度发生改变时,蛋白功能发生改变,不能有效激活耶一对外显子进行了系统的筛查,发现与中国人发病相关约案肧与根据/基因个外显子设计对引物,┰瞿康钠巍然后通过和庑蛞遣捎盟蜒跛纳ü夥ㄈ远舛列蛄校⒂基因库数据对照,发现突变位点后,对该序列进行反向测序,明确该突变位点确实存在,并用同样的一对引物扩增例溃疡性结肠炎患者和例健康体检者/基因相应目的片断,纯化铮猛姆椒ú庑虿⒂牖蚩⒏軵突变位点设计酶切引物及选择相应的内切酶,┰瞿康钠区域T贜せ頝狵墓讨校个充当效应器作用,通过其与丝氨酸一苏氨酸激酶,銫的嗜同种相互作用激活—蛴殖颇J绞侗鹗芴澹哂惺同分子结构模式包括细菌脂多糖琇佣筃聚化并与相互作用,进而激活—盢疌蛲槐涞贾缕浒被贾禄体先天性免疫系统低反应性,从而诱导机体对肠道细菌异常强烈的免疫反应而引起发生。本研究的目的在既往研究的基础上进一步扩大样本量对/基因床特征的相关性,为迸一步研究发病机制奠定基础,为防治该病提供理论依据。⑹占戏揭皆合萍捌胀饪迫氛锪俅沧柿贤暾⒈舜宋扪T垂叵档墓东及外省籍患者例ㄇ捌谑占±托率詹±,溃疡性结肠炎患者及门诊健康体检者各例,抽取外周血,提取白细胞基因组⒊晒┰鼵颊逳疌鐾庀宰雍螅玃产物纯化,数据对照。段,成功扩增后,用盖屑ㄒ逊⑾值腜突变位点。并发现其在组中文摘要
结果:疌蛑杏胫泄薱喙氐耐槐湮坏悖通过庑蚣癙盖醒橹ぃ例患者发现有槐洌渲例为杂合子改变,4亢献痈谋洌渲例为前期工作中已经发现的,新收病例中发现的,,而组和组没有发现齈突变,各组间差异有统计学意义犯怕始煅镻.,在对/基因个外显予其他片段的测序中没有发现新的突变位点。提示赡苁二/基因与中国人相关的突变位点。所有病例没有发现蠷,三个常见于西方人的基因多态位点。例患者中,例发病年龄小于岁的患者中有⑾諴突变,例发病年龄大于岁的患者中只有⑾諴突变,两组比较差异有统计学意义犯怕始煅镻.,说明槐溆隿颊叩姆⒉∧炅涿飨相关。例男性患者中发现齈突变,例女性患者中发现齈突变,两组比较差异无统计学意义犯怕始煅镻得鱌与患者的性别无相关性。蠵突变者病变部位均在回肠,而病变位于结肠及其他者未见槐洌髯榧浔冉喜钜煊型臣蒲б庖精确概率检验得鱌突变与患者的发病部位有明显相关性,有槐涞患者病变部位主要在回肠。蠵突变的患者全部并发有肠腔狭窄,而例无并发肠腔狭窄的患者中均未见槐洌阶榧浔冉喜钜煊型臣蒲б庖性,有槐涞腸颊呓弦撞⒎⒊η幌琳⒊W琛卸炔”涞幕颊咧发现齈突变,例重度病变的患者中发现齈突变,两组间比较差异无统计学意义犯怕始煅镻.,说明槐溆隿颊叩牟硕士学位论文及健康体检者组中的发生频率。改变与临床特征的相关性:犯怕始煅镻.,说明槐溆隒颊叩牟⒎⒅⒂忻飨韵喙
结论:变程度无明显相关性。⑽颐堑难芯糠⑾諴可能是/基因与中国人发病相关的而与无关,除饷挥蟹⑾制渌耐槐湮坏恪⑽颐窃谘芯恐忻挥蟹⑾諶,个常见于西方人的基因多态位点。中文摘要关键词:/基因突变克罗恩病嗵
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