M5BCAProteinAssaykit使用说明书.docx

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M5 BCA Protein Assay kit 使用说明书
M5 BCA Protein Assay kit
500T
MF071-01
【储存条件】
BSA Standard Solution 2-8
?C保存。其他组分室温保存 。
【产品简介】
BCA蛋白定量法是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。本产品是基于 BCA （ Bicin-choninic Acid ）法研制而成，实现了对蛋白质进行
快速、稳定、灵敏的浓度测定。其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽链结构能与 Cu2+络合生成络合物，同时将 Cu2+还原成Cu+。
BCA试剂可敏感特异地与 Cu+结合，形成稳定的有颜色的复合物。在 562 nm处有高的光吸收值，颜色的深浅与蛋白质浓度成正比， 可根据吸收值的大小来测定蛋白质的含量。本试剂盒含有牛血清白蛋白（ BSA ）溶液作为蛋白质标准品溶液，测定范围为 20〜2000
11 g/ml
【产品组分】
M5 BCA-A 2x 50 ml 室温保存
M5 BCA-B 3 ml 室温保存
BSA Standard Solution (2mg/ml) 2 ml 2-8?C 保存
【注意事项】
1. 本产品可以采用分光光度计（试管检测法）或者酶标仪（微孔检测法）测定蛋白浓度。
2. 建议每次测定蛋白样品时，绘制标准曲线，以获得准确数据。
3. BSA标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致（可用 %生理盐水稀释）。
4. 如待测样品中含较多的干扰物质（具体见附表 1），可采用Bradford法蛋白定量试剂盒或其他蛋白定量产品
【操作步骤】
1 .稀释BSA标准品：用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释 BSA标准品
管号 稀释液用量（心 BSA标准品用量（心 BSA标准品最终浓度（卬g/职
A
0
100
2
B
200
200
1
C
200
200 （从B管中取）

D
200
200 （从C管中取）

E
200
200 （从D管中取）

F
200
200 （从E管中取）

G
200
0
0 （空白）
2 .配置BCA工作液：
1）计算BCA工作液总量:
BCA工作液总量=（BSA标准品样本个数+未知样本个数）X复孔数海个样本BCA工作液体积
举例：BSA标准品样本个数为 7个，未知样本个数2个，复孔数3个
试管检测法：
BCA工作液总量=（7个BSA标准品样本+2个未知样本）＞3个复孔X2 ml/每个样本工作液体积 =54 ml
微孔检测法：
BCA工作液总量=（7个BSA标准品样本+2个未知样本）＞3个复孔X 200通/个样本工作液体积=
2）根据计算出的BCA工作液需要总量，将 BCA-A和BCA-B按照50:1的体积比，配制 BCA工作液，充分混匀。
注意：1）由于加样可能存在误差，建议配制 BCA工作液时，多配制1-2个孔。
2）新配制的BCA工作液室温密封条件下可稳定