触酶试验氧化酶试验.doc

触酶试验(1) 原理: 触酶又称过氧化氢酶,具有过氧化氢酶的细菌,能催化过氧化氢成为水和原子态氧,继而形成氧分子,出现气泡。(2) 方法: 取洁净玻片 1 张,用接种环挑取细菌,加 3% H2O2 1 滴,立即观察结果。(3) 结果: 若立即出现大量气泡为阳性。无气泡为阴性。(4) 应用: 大多需氧和兼性厌氧菌均产生过氧化氢酶,但链球菌科阴性,故常用此试验来鉴定。此外,金氏杆菌属的细菌也为阴性。分枝杆菌的鉴别则用耐热触酶试验, 结核分枝杆菌为阴性, 戈氏分枝杆菌和地分枝杆菌为阳性。注意事项: ①3% H2O2 溶液要新鲜配制。②不宜用血琼脂平板上生长的菌落, 因红细胞含有触酶,可致假阳性反应。③取对数生长期的细菌。氧化酶试验(1)原理:氧化酶(细胞色素氧化酶)是细胞色素呼吸酶系统的最终呼吸酶。(2)试剂: 1%盐酸四甲基对苯二胺或 1%盐酸二甲基对苯二胺。(3)方法:常用方法有三种; 1)菌落法:直接滴加试剂于被检菌菌落上。 2)滤纸法:取洁净滤纸一小块,沾取菌少许,然后加试剂。 3 )试剂纸片法:将滤纸片浸泡于试剂中制成试剂纸片,取菌涂于试剂纸上。(4)结果:细菌在与试剂接触 10秒内呈深紫色,为阳性。为保证结果的准确性, 分别以铜绿假单胞菌和大肠埃希菌作为阳性和阴性对照。(5)应用:主要用于肠杆菌科细菌与假单胞菌的鉴别,前者为阴性,后者为阳性。奈瑟菌属、莫拉菌属细菌也呈阳性反应。 耐酸性染色法(萎-倪二氏法) 石炭酸品红染色液碱性品红 95% 乙醇 10mL5% 酚水溶液 90mL 将品红溶解于乙醇中,然后与酚溶液混合。 3%盐酸-乙醇浓盐酸 3mL 95% 乙醇 97mL 复染液吕氏碱性美蓝染色液。美蓝 ;95% 乙醇 30mL ;% 氢氧化钾溶液 100mL ;将美蓝溶解于乙醇中,然后与氢氧化钾溶液混合。 染色法 将涂片在火焰上加热固定,滴加石炭酸品红染色液,徐徐加热至有蒸气出现,但切不可使沸