茶叶籽油中茶多酚的分光光度法测定方法.doc

茶叶籽油中茶多酚的分光光度法测定方法一、鉴别试验 1. 试剂: 1 克香荚兰素溶于 100ml 盐酸中,用时现配。 2. 鉴别方法: 取 10ml 样品溶液( 4% )放蒸发皿中蒸干,然后滴加香荚兰盐酸溶液生成樱桃红色。这是儿茶素类化合物的特异显色剂, 不受花色素和黄酮甙的干扰,具专属性,缺儿茶素的样品呈阴性。二、含量测定 1. 原理:多酚类物质能与亚铁离子生成蓝紫色络合物。用分光光度法测定其含量。 2. 试剂 酒石酸铁溶液:称硫酸亚铁( ) 1g 酒石酸钾钠( KNaC4 ) 5g 加水溶解并定容至 1L ,此液可稳定 10 天。 的索伦逊缓冲液(先配制以下两种溶液) a、 1/15 M 的磷酸氢二钠溶液:称取 ,加水溶解并稀释至 1L。 b、 1/15M 的磷酸二氢钾溶液:称取经 110 ℃烘干 2h的 ,加水溶解至 1L。取溶液 a 85ml 和溶液 b 15ml 混匀,即得 的缓冲液。 茶多酚标准溶液秤取茶多酚标准 ,加溶解并稀释至 。 3. 测定方法 茶多酚标准曲线制备: 分别吸取茶多酚标准溶液( 2mg/ml ): 0, , , , , 分别盛放 的比色管中,加水 ,再加 水,然后加 酒石酸铁溶液,加 缓冲液至刻度,摇匀,放 540nm 比色。 4. 样品测定:称取一定量样品(约 1g) ,用水溶解至 , 经过滤, 弃去初滤液, 吸取 滤液放 25ml 的比色管中,加 l 水, 再加 水, 然后加 酒石酸铁溶液, 然后用 缓冲液稀释至刻度。与标准管同时比色测定。 4. 计算: X=­C × V1 /V2/m × 100/1000 式中 X :样品中茶多酚含量 g/100g ; V1 :样品溶液总体积 mL; V2 :测定用样品溶液体积 mL; m :样品质量 g。茶叶籽油中茶多酚的茶多酚含量的测定一、原理产品中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。用分光光度法测定其含量。二、仪器和用具实验室常规仪器及下列各项。 1、分析天平:感量 2、容量瓶: 100ml 3、分光光度仪三、试剂和溶液所用试剂应为分析纯( AR) ,水为蒸馏水。 1、酒石酸亚铁溶液: 称取 1g( 准确至 ) 硫酸亚铁和 5g (准确至 ) 酒石酸钾钠, 用水溶解并定容至 1000ml ( 溶液应避光,低温保存,有效期一个月)。 2、 磷酸盐缓冲液: (1) 1/15M 磷酸氢钠:称取 磷酸氢二钠,加水溶解后定容至 1000ml 。(2) 1/15M 磷酸二氢钾: 称取