一氧化氮与吗啡镇痛作用及其镇痛耐受关系的实验研究.pdf

中国协和医科大学
博士学位论文
一氧化氮与吗啡镇痛作用及其镇痛耐受关系的实验研究
姓名：于玲
申请学位级别：博士
专业：麻醉学
指导教师：薛富善
20060301
鑥，勺魑I撕π愿惺苌窬P朔艿谋曛疚性物质一““。在动物炎性疼痛模型进行的研究发现，虮泶镌黾佑胪淳豕舻男纬珊头⒄有关。既往研究表明，受体在合成过程中具有至关重要的作用“”⋯。受体的非竞争性拮抗剂一兴奋性氨基酸珽从，在哺乳动物神经系统内含量丰富、分布广泛。它们是大多数兴奋性神经元的递质，尤其是谷氨酸，它参与兴奋性突触的传递，与突触的可塑性有关。目前认为谷氨酸引起的脊髓神经元敏感化在炎性疼痛的敏感状态中发挥着重要作用““薄Ａ硗猓琋凸劝彼峥梢运虻鹘冢两者的产生和释放可以互相促进““⋯，因此谷氨酸在疼痛中的作用越来越受到人们的重视。有研究发现，长期应用吗啡可导致与阿片依赖和耐受有关的一些重要部位基因表达发生改变”“取鄄斓剑鸱日蛲茨褪艽笫蟮募顾鐽表达上调，分析显示蛋白在吗啡镇痛耐受大鼠脊髓中的表达较生理盐水对照组显著性高叮惫鄄斓铰鸱日蛲茨褪艽笫蠹顾璧腘芴褰岷匣钚栽銮俊Ｒ虼耍研究中我们选用上述的这些指标来探讨种萍劣跋炻鸱日蛲醇捌湔蛲茨褪艿幕啤虽然福尔马林炎性疼痛大鼠模型是急性相吐相弁茨Ｐ停福尔马林炎性刺激作为持续性的伤害性刺激，可能与临床慢性疼痛的相关性更大。由于刺激性质的不同以及不同部位疼痛的中枢机制各异，所以在评价某一种镇痛物质对伤害性感受的具体影响时，不应仅采用一种疼痛模型进行管状视野评估，而是应采用多种模型进行全面地评估。本研究拟采用福尔马林炎性疼痛和热甩尾测痛两种大鼠模型，通过全身应用狽垂鄄炱涠月鸱瓤股撕π宰饔煤投月鸱日蛲茨褪艿牡鹘谧饔茫根据脊髓后角和中脑导水管周围灰质，神经元中猣基因表达的变化以及脊髓和中脑组织细胞外谷氨基酸含量的变化来探讨影响吗啡镇痛及其镇痛耐受的机制；根据吗啡镇痛耐受大鼠以及狽月鸱日蛲茨褪艽鼠脊髓和中脑、受体亚单位和亚单位表达的影响来进一步揭示吗啡镇痛耐受与系统之间的关系。为临床上解决吗啡镇痛耐受现象提供有益的启示。中国协和医科火学博上研究生论文
中文摘要一氧化氮与吗啡镇痛作用及其镇痛耐受关系的实验研究单次应用狽月鸱日蛲醋饔玫挠跋第一部分吗啡是目前最常用于严重疼痛和慢性疼痛治疗的阿片类药物，其主要缺点是容易出现镇痛耐受，从而降低长期应用的镇痛效果。近年来，针对吗啡镇痛耐受已经开展了许多研究，通常认为其发生机制非常复杂，涉及许多生物因子和神经传导通路，并且其中的许多因素和环节尚未被完全阐明。一氧化氮是近年来倍受生物医学界关注的一种气体分子，作为一种重要的化学递质和细胞内信号分子，在机体内的许多生物调节机制中发挥着关键性作用。目前已有一些研究试图阐释在伤害性感受中的作用以及与阿片受体的相互作用，尤其是对吗啡镇痛及其镇痛耐受的影响，但是由于各研究所采用的实验动物模型、观察方法、给药途径和用药方法等方面的差别，因此未能取得一致的结果。由鉴于此，本研究采用福尔马林炎性疼痛和热甩尾测痛两种大鼠模型观察了单次和长期全身应用非特异性种萍烈籐—对吗啡镇痛作用及其镇痛耐受的影响；研究中检测了脊髓和中脑的猣基因表达、细胞外谷氨酸含量猯丌】蚇表达的变化，以探讨与吗啡镇痛及其镇痛耐受机制之间的关系。本研究的主要目的是进一步阐释在吗啡镇痛及其镇痛耐受中的作用，以为俅采辖决吗啡镇痛耐受这一难题提供有益的启示。选择健康成年狣笫唬渌婊殖组：为对照组：腹腔注射生理盐水，笤俅胃骨蛔⑸渖硌嗡：：腹腔注射生理盐水蟾骨蛔⑸銵—／；焊骨蛔射生理盐水／：焊骨蛔⑸渖硌水蟾骨蛔⑸渎鸱痥组焊骨蛔⑸銵—／。焊骨蛔⑸銵—蟾骨注射吗啡／。在各组末次给药螅诖笫笞蠛笳破は伦⑸％福尔马林，随后诩锹计涮蛞ё⑸渥闶奔洹３组和橹猓渌槎锓治A礁鲅组，第一亚组动物记录完毕后取＜顾杞诙魏椭心员瓯咀鯿—庖咦橹Ъ觳椤５以及、／，中国协和医科大学博士研究生论文，
一——第二部分长期应用狽月鸱日蛲茨褪艿挠跋锉に芏樾筒槔级椋翌圣兰堡兰二亚组动物记录完毕后取＜顾杞诙魏椭心员瓯咀鱿赴夤劝彼岷坎舛ā疼痛行为学观察结果显示，与榧炊哉兆橄啾龋组和榈腎相⑸涓６砹后蛞ё⑸渥闶奔湮尴灾愿谋洌组的Ⅱ相⑸涓６砹趾緁舔咬注射足时间显著性缩短。榈腎相和相舔咬注射足时间分别较橄灾运醵．ズ％。虽然联合应用狽／和吗啡的橄允綢相和相舔咬注射足时间显著性缩短，但是与联合应用玁／和吗啡的橄啾任尴灾圆钜臁Ｃ疫组织化学分析结果显示，与橄啾龋组、楹组注射足同侧和对侧脊髓以及中脑导水管周围灰质窬5腸—虮泶锵灾约跎伲徊⑶襂嗵蛞ё