基于量子点和核酸适体的肺癌细胞识别与检测.pdf

于量子点和核酸适识别与检测体的肺癌细胞基湖南大学硕士学位论文武鲞重—一一芏丛袷王担熟熬攫墙差望丝堂垡工堂院生墨目筌避委虽金圭廑;拯苤垡数攫学校代密级:堂僮虫请厶姓名昱嘘姓名壁驱整僮;童些名整盆抚丝堂。一诠文握童旦期;诠塞筌趱旦甥;生学号:影:唬‘’·’...:
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导师签名之加多妒期:幽年,月;彳。必作者签名别者崤日期:—矽//年,月弓作者签名:舐寿渗湖南大学学位论文原创性声明学位论文版权使用授权书日期:≯/阵岁月;/日本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权湖南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于⒈C芸冢年解密后适用本授权书。⒉槐C躣。朐谝陨舷嘤Ψ娇蚰诖颉啊獭
摘要孵育浓度进行了优化。结果表明,婧妫琒核酸适体蔷爸甘患呐涮逑低辰,技术体外筛选得到的、由或槌傻亩痰牡チ春塑账嵝蛄小K肽勘晡锝岷暇哂懈咛匾煨院透咔缀力的特点,并且容易合成与修饰,稳定性好,目标物种类广泛,免疫原性低,越来越多地应用于生物分析、化学生物学等领域。量子点具有优越的光物理性能,如荧光量子产率高、光稳定性强、可以实现一元激发多元发射等等,在分子诊断、靶向治疗、生物医学成像与生物传感等方面得到了广泛应用。本论文以非小细胞肺癌细胞为研究对象,以核酸适体为特异性识别基元,为了提高颗粒的细胞识别效率,发展简单、通用的癌细胞检测方法,完成了以下工作:诤怂崾侍逵ü馓秸攵坎舛ㄏ赴砻婺な芴宓鞍椎姆植济芏利用能与细胞膜受体蛋白高特异性结合的核酸适体荧光探针,以细胞为识别对象,通过测定核酸适体探针与细胞孵育前后荧光强度的变化,定量测定细胞表面核酸适体靶向的膜受体蛋白的分布密度。结果表明,平均每个细胞表面核酸适体的目标膜受体蛋白数目约为×觯布密度约为个/肛,该分布密度保证体积较大的量子点可以作为荧光标记物用于癌细胞识别,为量子点结合核酸适体用于细胞的识别提供了保障。诹孔拥愫秃怂崾侍宓姆切∠赴伟〢赴奶匾煨允侗用量子点作为核酸适体的标记物,采用分步识别法怂崾侍逑仁侗鹣赴再用量子点进行荧光标记迪至硕訟赴奶匾煨允侗稹?疾炝肆教鹾酸适体、在不同温度下对细胞的识别差异,并对量子点孵育时间、寄芴匾煨允侗餉细胞。量子点孵育时间为保ü庑藕抛钋浚涣孔拥闩ǘ任阳性信号和背景间的差异最大。该工作说明了分步识别法可以实现细胞的高效识别,为进一步的细胞检测奠定基础。诹孔拥愫秃怂崾侍宥訟赴亩考觳在第二部分工作基础之上,比较了分步识别法与一步识别法孔拥恪⒑酸适体先形成复合物,再进行细胞识别南赴上裥Ч=峁砻鳎诹子点和核酸适体的分步识别法避免了空间位阻对核酸适体构象的影响,相比于一步识别法,特异性更高,信背比约是一步识别法的丁T诖嘶∩希岷量子点荧光强度高、光稳定性强、信背比高等优势,实现了非小细胞肺癌时,
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细胞的定量检测,检测限达到痬R虼耍诹孔拥愫秃怂崾侍的分步识别法具有操作简单、特异性好、灵敏度高等优势,有望应用于肿瘤的早期诊断与治疗。关键词:核酸适体;量子点;细胞;膜受体蛋白硕士学位论文
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