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实验十一、食品中亚硫酸盐含量测定
标准依据:
一、目的要求
学习盐酸副玫瑰苯胺显色比色法测定食品中亚硫酸盐的实验原理，掌握实验的操作要点及测定方法。
二、实验原理
亚硫酸盐与四氯汞钠反应，生成稳定的络合物，再与甲醛及盐酸副玫瑰苯胺作用生成紫红色络合物，此络合物于波长550nm处有最大吸收峰，且在一定范围内其颜色的深浅与亚硫酸盐的浓度成正比，可以比色定量。结果以试样中二氧化硫的含量表示。
三、仪器与试剂
(一)试剂
1、四氯汞钠吸收液；2、 % 氨基磺酸铵溶液(12g/L)；3、甲醛溶液（2g/L）；4、淀粉指示液；
5、亚铁氰化钾溶液；6、乙酸锌溶液；7、盐酸副玫瑰苯胺溶液；8、碘溶液[c(1/2I2)= mol/L]；
9、硫代硫酸钠标准溶液[c(Na2S2O3·5H2O)= mol/L]；10、二氧化硫标准溶液；11、二氧化硫使用液：临用前将二氧化硫标准溶液以四氯汞钠吸收液稀释成每毫升相当于2μg二氧化硫；12、氢氧化钠溶液（20g/L）；13、硫酸（1+71）。
（二）、仪器:分光光度计
四、实验步骤
（一）、样品处理
1、（试样量可视含量高低而定），以少量水溶解，置于100 mL容量瓶中，加入4mL氢氧化钠溶液（20g/L），5min后加入4mL硫酸（1+71），然后加入20mL四氯汞钠吸收液，以水稀释至刻度。
2、固体试样如饼干、～，以少量水湿润并移入100 mL容量瓶中，然后加入20mL四氯汞钠吸收液，浸泡4 h以上，若上层溶液不澄清可加入亚铁氰化钾溶液 ，最后用水稀释至100 mL刻度，过滤后备用。
3、～ mL试样，置于100mL容量瓶中，以少量水稀释，加20 mL四氯汞钠吸收液，摇匀，最后加水至刻度，混匀，必要时过滤备用。
（二）、测定
～ mL上述试样处理液于25 mL带塞比色管中。
另吸取0、、、、、、 mL二氧化硫标准使用液（相当于0、、、、、、、），分别置于25mL带塞比色管中。
于试样及标准管中各加入四氯汞钠吸收液至10 mL，然后再加入1 mL氨基磺酸铵溶液（12g/L）、1mL甲醛溶液（2g/L）及1 mL盐酸副玫瑰苯胺溶液，摇匀，放置20 min。用1cm比色杯，以零管调节零点，于波长550 nm处测吸光度，绘制标准曲线比较。
五、结果计算
式中 ：
X——测试样中二氧化硫的含量（g/kg）；
A——测定用样液中二氧化硫的质量（μg）；
m——试样质量（g）；
V——测定用样液的体积（mL）。
计算结果表示到三位有效数字。
六、注意事项及说明
1、本实验法检出浓度为1mg/kg。
2、要求在重复性条件下获得两次独立测定结果的绝对差值不得超过10%。
3、亚硫酸和食品中的醛、酮和糖相结合，以结合型的亚硫酸存在于食品中。加碱是将食品中的二氧化硫释放出来，加硫酸是为了中和碱，这是因为总的显色反应是在微酸性条件下进行的。
4、显色时间时显色有影