微生物细胞大小的测定.ppt

微生物细胞大小的测定
一、目的要求
了解目镜测微尺和镜台测微尺的构造和使用原理；掌握微生物细胞大小的测定方法。
二、基本原理
微生物细胞大小，是微生物的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。由于菌体很小，只能在显微镜下测量。用来测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺（图3）和镜台测微尺（图4）。
目镜测微尺（图3，A）是一块可放在接目镜内的隔板上的圆形小玻片，其中央刻有精确的刻度，有等分50小格或100小格两种，每5小格间有一长线相隔。由于所用接目镜放大倍数和接物镜放大倍数的不同，目镜测微尺每小格所代表的实际长度也就不同，因此，目镜测微尺不能直接用来测量微生物的大小，在使用前必须用镜台测微尺进行校正，以求得在一定放大倍数的接目镜和接物镜下该目镜测微尺每小格的相对值，然后才可用来测量微生物的大小。
镜台测微尺（图4）是中央部分刻有精确等分线的载玻片。一般将1mm等分为100格（2 mm等分为200格），（即10μm），是专用于校正目镜测微尺每格长度的。
图 4 目测微尺和镜台测微尺  ①目镜测微尺②镜台测微尺③镜台测微尺的中心部放大④镜台测微尺标实目镜测微尺时两者重叠  A. 目镜测微尺 B. 镜台测微尺
三、器材
酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）斜面菌种，目镜测微尺，镜台测微尺，显微镜，擦镜纸，香柏油，二甲苯等。
四、操作步骤
1．目镜测微尺的标定
（ 1 ）放置目镜测微尺 取出接目镜，旋开接目镜透镜，将目镜测微尺的刻度朝下放在接目镜筒内的隔板上（图3，B），然后旋上接目透镜，最后将此接目镜插入镜筒内（图3，C）。
（ 2 ）放置镜台测微尺 将镜台测微尺置于显微镜的载物台上，使刻度面朝上。
（ 3 ）校正目镜测微尺
先用低倍镜观察，对准焦距，当看清镜台测微尺后，转动接目镜，使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器，使目镜测微尺和镜台测微尺的某一区间的两对刻度线完全重合，然后计数出两对重合线之间各自所占的格数。例如图4④中A（目镜测微尺）上5格对准B镜台测微尺上的2格，B的1格为10μm，2格的长度为20μm, 所以目镜测微尺上1小格的长度为4μm。