bpg层析柱标准装柱流程规范.doc

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操作标准
目的：为了使BPG300层析柱装柱过程可重复，并能够得到较好的柱效，故建立此操作标准。
范围：配合ÄKTA process系统进展有效的蛋白质纯化操作。
责任人：层析工序操作人员
标准操作程序：
1 根本术语概念
填料因子〔Packing Factor, PF〕：指在在装柱过程中，用低流速〔如60cm/h〕对填料进展沉降压缩得到的调料高度和最后装柱完成时填料高度〔柱高〕的比值，
GEHC生产的各种常见填料的PF参见?GEHC AxiChrom 300-1000 columns User Manual 28-9562-89 Edition AA?；
线性流速〔linear flow rate〕：单位时间内液体流经的直线距离，常用cm/h表示；
体积流速〔volume flow rate〕：单位时间内液体流经的空间容积，常用
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ml/min表示；
换算：
2 准备工作
检查层析柱的完整性，所带配件，是否水平〔用水平仪矫正〕，是否清洁〔如有污染应进展清洗〕。
确定所用填料及其特性、浓度等
以DEAE Sepharose Fast Flow填料为例，其填料因子〔PF〕，新填料〔slurry〕浓度为75%〔保存于20%乙醇中〕，耐压3bar。
确定放大后的工艺参数
以XX生化制药股份XX的放大工艺为例，
中试工艺参数：
柱高h=10cm；体积流速v1=3ml/min；柱内径d=.
即，线性流速v2=v1/s柱=3/(×) cm/min= cm/min；
样品与填料接触时间t=h/v2=10/=；
在工艺的线性放大中h、v2和t均不变，那么可保证样品出峰的位置〔洗脱时间〕和形状不变。
使用BPG300层析柱进展放大的工艺参数：
装柱体积V柱= S柱h=××1L=7L；
装柱需要slurry体积Vslurry=V柱