青葙子化学成分及保肝活性的的分析研究.pdf

青葙子的化学成分及保肝活性研究摘要青葙子来源于苋科青葙属植物青葙(Celosia argentea L.)的干燥成熟种子, 始载于《神农本草经》,是药典收载品种。其味苦、性微寒,归肝经。具有清肝, 明目,退翳之功效。用于肝热目赤,眼生翳膜,视物昏花,肝火眩晕。本论文在课题组前期从青葙子活性部位得到了两个五环三萜皂苷化合物青葙苷A和青葙苷B基础上,作为延续性工作,继续对青葙子活性部位的化学成分进行研究,又获得两个五环三萜皂苷化合物。两个化合物应用理化常数测定和光谱学方法(mp、IR、1H-NMR、13C-NMR、HMBC、HMQC、COSY、NOSEY、 、)鉴定了两个化合物的化学结构,这两个化合物均为新化合物, 分别命名为青葙苷C(Celosin C)和青葙苷D(Celosin D)。实验对青葙子的有效部位进行了提取纯化工艺研究,确立了最佳制备工艺路线。青葙子药材粉碎,过40目筛,用50%的乙醇作提取溶媒,先以等倍量溶媒浸润24h,再收集5倍量溶媒渗漉液,。本工艺对青葙子的有效部位的提取率超过90%,提取较为完全。我们选用树脂D101为填料, 通过对上样量与树脂体积比例、洗脱流速、乙醇洗脱浓度的考察与结果分析,确定了青葙子的活性部位的纯化工艺:上样量与树脂体积比例为l:5, Bm 的流速洗脱,收集乙醇提取物,重复上样2次,青葙苷C和青葙苷D的含量可达70%以上,称青葙总皂苷。达到五类新药的要求,为进一步研究开发新药积累了资料。本实验以四氯化碳诱导的小鼠肝损伤为模型,以动物血清天冬氨酸氨基转氨酶(AST)、丙氨酸氨基转氨酶(√岍)及肝组织匀浆中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶()、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)以及肝组织病理学观察为指标,对青葙总皂苷的保肝活性进行了研究。结果表明青葙总皂苷连续口服给药三天,·k分1—·kg。1剂量范围内,对CCl4诱导的小鼠肝损伤有保护作用,表现在能够显著的降低血清转氨酶水平,增强肝组织抗氧化水平,改善肝组织的病变程度。病理切片显示,模型组小鼠肝组织呈局灶性坏死,坏死灶内肝细胞结构已完全破坏,肝细胞轮廓消失,并伴有大量以淋巴细胞为主的炎症细胞浸润,中高剂量组动物的肝小叶结构清晰,肝细胞排列紊乱, 肝内偶见水样变性细胞,无炎症细胞浸润。l4引起的生化改第二军医大学硕士学位论文变有明显的预防作用。本研究结果为继续研究青葙子的化学成分和探讨青葙子防治肝损伤的物质基础提供科学根据,同时为青葙子资源的合理开发与利用奠定基础。关键词:青葙子,肝损伤,化学成分,制备工艺青葙子的化学成分及保肝活性研究 Abstract Celosia argentea L.(Family·Amamnthaceae)is firstly recorded inShen Nong's folklore practice,the seeds of Celosia argentea been used traditionally for removing liver-heat,improving eyesight,clearing wind—heat, lowering the blood pressure and anti-inflammation,according to Chinese Pharmacopoeia(edition of2005). Inorder tostudy thechemical constituents ofCelosia argentea and provide evidence forestablishing thequality standards ofCelosia argentea L.,we isolatedand purified thechemical constituents of30%and 60%fractions ofCelosia argentea by solvent extraction and structures were identified onthe parison with thedatareported in aresult,8compounds were isolatedand identifiedbyspectralanalysis (nap,W IR,1H-NMR,”C-NMR,MS,HMBC,HMQC,cosY,NOSEY).They were stigmasterol(1),13-sitosterol(2),Ce