第四节 食品中亚硝酸盐与硝酸盐的含量测定.doc

第四节食品中亚硝酸盐与硝酸盐的含量测定一、亚硝酸盐测定( 格里斯试剂比色法) (一)目的熟悉食品中亚硝酸盐的卫生标准,掌握食品中亚硝酸盐含量测定的基本方法。(二)原理样品经沉淀蛋白质、除去脂肪后,在弱酸性条件下亚硝酸盐与对氨基苯磺酸重氮化后,在与 N-1- 萘基乙二胺偶合形成紫红色染料后,与标准比较定量。(三)试剂实验用水为蒸馏水,试剂不加说明者,均为分析纯试剂。 :1L容量瓶中加入 500ml 水,准确加入 盐酸,振荡混匀,准确加入 50ml 氢氧化铵,用水稀释至刻度。必要时用稀盐酸和稀氢氧化铵调试至 ~ 。 硫酸锌溶液:称取 120g 硫酸锌(ZnSO4 ·7H2O) ,用水溶解, 并稀释至 1000ml 。 氢氧化钠溶液:称取 20g 氢氧化钠用水溶解,稀释至 1L。 :称取 10g 对氨基苯磺酸,溶于 700ml 水和 300ml 冰乙酸中,置棕色瓶中混匀,室温保存。 % N-1- 萘基乙二胺溶液:称取 N-1- 萘基乙二胺,加 60% 乙酸溶解并稀释至 100ml ,混匀后,置棕色瓶中,在冰箱中保存,一周内稳定。 :临用前将 % N-1- 萘基乙二胺溶液和对氨基苯磺酸溶液等体积混合。 :准确称取 于硅胶干燥器中干燥 24h 的亚硝酸钠,加水溶解移入 500ml 容量瓶中,加100ml 氯化胺缓冲液,加水稀释至刻度, 混匀,在 4℃避光保存。此溶液每毫升相当于 500 μg的亚硝酸钠。 :临用前,吸取亚硝酸钠标准溶液 ,置于 100m l 容量瓶中,加水稀释至刻度,此溶液每毫升相当于 μg亚硝酸钠。(四)仪器 (五) 操作方法 ( 粮食取 5g) 经绞碎混匀样品,置于打碎机中, 加70ml 水和 12ml 2%氢氧化钠溶液,混匀,用 2%氢氧化钠溶液调样品至 pH8 , 定量转移至 200ml 容量瓶中加 10ml 硫酸锌溶液,混匀,如不产生白色沉淀,再补加 2~5ml 氢氧化钠,混匀。置 60℃水浴中加热 10min ,取出后冷至室温,加水至刻度,混匀。放置 ,用滤纸过滤,弃去初滤液 20ml ,收集滤液备用。 :吸取 0, , , , , , l 亚硝酸钠标准使用液(相当于 0, ,5,10,15,20,25μg亚硝酸钠),分别置于25m l带塞比色管中。 l氯化胺缓冲液,% 乙酸后立即加入 显色剂,加水至刻度,混匀,在暗处静置 25min ,用 1cm 比色杯(灵敏度低时可换 2cm 比色杯),以零管调零点,于波长 550nm 处测吸光度, 绘制标准曲线。低含量样品以制备低含量标准曲线计算,标准系列为:吸取 0, , , , , 亚硝酸钠标准使用液(分别相当于 0,2,4,6,8,10μg亚硝酸钠)。 :吸取 上述滤液(样品处理滤液)于 25ml 带塞比色管中,其