实验三红细胞计数血红蛋白测定及白细胞分类计数上课用.ppt

红细胞计数、血红蛋白测定及白细胞分类计数
1
红细胞计数
（一）原理
用等渗稀释液将血液稀释并充入计数池后，于显微镜下计数。
（二）试剂与器材
Hayem液（氯化高汞、氯化钠、结晶硫酸钠）
血细胞计数板
2
（三）操作
2ml稀释液+10ul血液，洗涤，振荡，混匀，充池，高倍镜计数中央大方格周围四个及中央五个中方格内细胞总数。
3
4
（四）计算
细胞数/5×25 × 10 × 200 ×106 =细胞数/100 ×1012/L
（五）质量保证
;
; ，充液不当

，红细胞易聚集。
5
（六）临床意义
1、增多
（1）相对性增多
（2）绝对性增多
（3）真性红细胞增多症
2、减少
（1）造血物质减少 （2）红细胞破坏过多
（3）红细胞丢失过多（4）骨髓造血功能衰竭
3、红细胞计数和血红蛋白测定的关系
6
二、血红蛋白测定（HiCN法）
（一）原理
血细胞经血红蛋白转化液溶血后，除SHb外，其他血红蛋白均被高铁氰化钾氧化成Hi，与CN—结合生成稳定的氰化高铁血红蛋白。它的最大吸收峰在540nm，测定A，得血红蛋白浓度。
（二）试剂、器材
文齐氏液、721分光光度计
7
（三）操作
5ml血红蛋白转化液+20ul血液，振荡，混匀，5min后721分光光度计上测定。波长540nm。转化液调零，1cm比色杯。
8
（四）结果报告
1. A/44 /1 ×64458/1000 ×251=A ×（g/L）
2..标准曲线法测定参考标准品的A值，以Hb浓度为横坐标，A值为纵坐标，绘制通过零点的曲线，查表。
3. K值法: K=Hb总和 /A值总和
Hb浓度= A ×K
9
（五）质量保证
，白细胞异常增多，SHb疾病时，测定液体发生浑浊，可增加NaCl，消除影响。

每升加次氯酸钠35ml，敞开过夜。
CN-氧化成CO2和N2，或水解CO32-和NH4+。
3、对分光光度计相关参数的校正。
10