细菌分离培养接种技术及生化.ppt

细菌分离培养接种技术及生化
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一、培养基的种类和选择(一)基本条件



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(二)培养基
培养基(culture medium)是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养物制品。
用途：
①可用于细菌的分离纯化、传代和菌种保存
②可用于研究细菌的生理生化特性
③是对病原菌分离鉴定的主要环节和必不可少的手段
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：
⑴营养物质：水、蛋白胨、肉浸液、牛肉膏、糖醇类、血液、无机盐、鸡蛋和动物血清、生长因子（Vit、aa、嘌呤、嘧啶等）。
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⑵凝固物质：
最常用的为琼脂(agar)，它是从石花菜中提出来的一种半乳糖胶，100℃溶解，40℃凝固，可利用琼脂来改变培养基的物理性状(固体或半固体)，它是理想的固体培养基的赋形剂，其本身不被细菌分解利用，也无营养作用。
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⑶抑菌剂和指示剂：
不是细菌生长繁殖的必需物质，是制备细菌的选择、鉴别培养基和判断结果的需要。
常用的抑菌剂有：胆盐、煌绿、亚硫酸钠、亚硒酸钠及一些染料和某些抗生素等。
常用的指示剂有：酚红、中性红、甲基红、溴甲酚紫、溴麝香草酚蓝、中国兰等酸碱指示剂，美兰为常用的氧化还原指示剂。
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液体培养基：牛肉汤 (牛肉浸液+1%蛋白胨
+%NaCl )
半固体培养基：~% agar
固体培养基： 营养物+ 2% agar
按物理性状
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基础培养基：是其他培养基的基础，如普通肉汤、
普通琼脂平板、斜面、高层
营养培养基：BAP、罗-琴培养基、吕氏血清斜面
选择培养基：SS平板、BS平板、Mac平板等
鉴别培养基：糖发酵管、MIU、KIA、TSI等
特殊培养基：厌氧培养基、高渗培养基等
按用途
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⑴肉膏汤的制备：
%牛肉浸膏 + 1%蛋白胨 + %NaCl加热溶解，调pH ~，分装，121℃，20分钟高压灭菌冷后待用。可用于标本和细菌的增菌。
⑵普通琼脂平板、斜面、高层：
肉膏汤 + 2%agar，加热溶解， 121℃，20分钟高压灭菌冷至50℃
平皿→ 普通琼脂平板：分离纯培养和药敏
倾倒 试管(斜放)→普通琼脂斜面：增菌、保存细菌
试管(直立)→普通琼脂高层：备用
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⑶血琼脂平板：
普通琼脂平板营养物质灭菌冷至50℃ + 5%~10%脱纤维SRbc或RRbc，摇匀，倾倒无菌平皿，冷凝后即成血平板。
常用于营养要求较高的细菌的分离纯培养和药敏。
⑷半固体肉汤：
牛肉汤(牛肉浸膏汤)+ %~%agar→加热溶化 →分装→高压灭菌→冷却即成。
常用于保存菌种和观察细菌的动力。
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