肌肝糖元说明书(南京建成).doc

肌肝糖元说明书(南京建成).doc本试剂盒仅用于科研、实验室 南京建成
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肌糖元及肝糖元测定试剂盒
、原理：
糖元在浓硫酸的作用下可脱水生成糖醛衍生物， 后者再与蒽酮作用形成蓝色化合物， 与同
法处理的标准葡萄糖溶液比色定量。 糖元在浓碱溶液中非常稳定， 故在显色之前先将组织放入
浓碱中加热以破坏其它成分而保留糖元。
、试剂组成与配制：（50T）
1、 碱溶液40ml XI瓶，室温或2~8C保存6个月。
2、 1mg/ml葡萄糖标准贮备液 5ml XI支，室温或2~8C保存6个月。
： 葡萄糖标准品贮备液：蒸馏水 =1 : 99,现用现配，保
存一天。
3、 显色剂：粉剂X6支，室温或2~8 C保存6个月。用时每支加浓硫酸 25ml （浓硫酸自备），
混匀，现用现配。
显色剂配制的注意点：1、浓硫酸浓度必须 95% — 98%的分析纯并且不可开瓶太久（开瓶 放置太久，浓度会降低）
2、 配制显色剂的容器和量筒必须绝对干燥，否则会使试剂三无法 充分溶解
3、 配制显色剂时：先将粉剂倒入烧杯中，然后加少量浓硫酸（约 10ml）,用玻棒压碎粉剂，使其充分溶解，然后再加入剩余的浓 硫酸，充分搅拌后室温避光保存。
三、 样本前处理：
1、 取样：取新鲜肝脏或肌肉样本用生理盐水漂洗后，滤纸吸干，称重（样本重量w 100mg为
宜，不要＞ 100mg ）。
2、 水解：按样本重量（mg）:碱液体积（卩l） =1 : 3, —起加入试管中，沸水浴煮 20min,
流水冷却。
例如：肝脏组织称重 75mg按重量体积比1 ：3应加入碱液的量为 225卩l ; 肌肉组织称重85mg按重量体积比1 ：3应加入碱液的量为 255卩l。
*注：在煮前用冰箱保鲜膜将管口扎起，以防水分蒸发，然后在膜上用针头扎一小孔，以 便气体热胀冷缩。
3、 将糖元水解液进一步制备成糖元检测液：
肝糖元检测液为1%，加蒸馏水的量为：肝脏重量X 100—肝脏重量X 4*=肝脏重量X 96
肌糖元检测液为5%，加蒸馏水的量为：肌肉重量X 20—肌肉重量X 4*=肌肉重量X 16
注：4*为水解时碱液与组织的体积数。
例如上例：制备1%肝糖元检测液，加蒸馏水的量为： 75X 96=7200卩l = ml;
制备5%肌糖元检测液，加蒸馏水的量为： 85 X 16=1360卩l =1 .36ml。
四、 操作表：
' 空白管
标准管
测定管
蒸馏水（ml） 1
.0 0
.9
标准(ml)

糖兀检测液（ml）
0. 1
显色液（ml） 2
2
2
混匀后置沸水中煮 5min，冷却后于620nm波长，1cm光径，空白管调零，测各管 OD值。
本试剂盒仅用于科研、实验室 南京建成
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五、计算与举例:
1、公式:
糖元含量 测定管0D值标准管含量
= x
（mg/g组织） 标准管0D值 （） 注：*样本测试前稀释倍数为样本前处理第
样本测试前
x
稀释倍数
*
X10**
-
3步中稀释倍数，即肝脏为 100、肌肉为20。