高效液相色谱仪.ppt

高效液相色谱 2010/8/21 1一、高效液相色谱仪 Agilent 1100 2 Waters 2487 3 借助气相色谱的理论演变二、高效液相色谱法的特点经典的柱色谱高效液相色谱的模块 4 20 世纪 70 年代后发展迅速,它在技术上采用高压泵,高效固定相和高灵敏度的检测器, 实现了分析速度快,分离效率高和操作自动化。特点:高压、高效、高速分离对象:适用高沸点、热不稳定有机及生化试样分离分析(与 GC区分) 5三、流程及主要部件 6 2. 主要部件(1) 高压输液泵单元泵双元泵 7 高压泵作用:输送流动相。也即是贮液瓶中的有机溶剂或缓冲溶液靠高压泵送入色谱柱。由于色谱柱的阻力很大, 高压泵必须克服阻力以恒定流速输送流动相,这是保证色谱仪精确度的前提。常用的压力范围:150 ~350 ×10 5 Pa 欧美等国家习惯使用 psi 作单位 PSI 英文全称为 Pounds per square inch 。定义为英镑/平方英寸, 它们之间的换算关系为: 1bar ≈ =10 5 Pa, 145psi = 1Mpa 1psi = = 8 高压泵应具有以下性能?流量稳定,精度在 1% 左右?输出压力高,通常 20 ~ 30MPa ,最高 50 MPa ?流量范围宽,一般在 ~10mL/min 范围内?能抗溶剂腐蚀?压力波动小、更换溶剂方便、容易清洗、具梯度洗脱?操作方便、容易维修 9 ?根据泵的操作原理不同,分为恒压泵和恒流泵气动放大泵(恒压泵) 往复泵(恒流泵)是目前液相色谱使用最普遍的一种高压泵。其中又分单头往复泵和双头往复泵。往复泵的优点是泵头内腔体积小,容易洗净,故更换溶剂十分方便,尤其适合做色谱条件试验时使用。气动放大泵往复柱塞泵 10