糖类脂肪蛋白质核酸的鉴定实用教案.pptx

（一）生物组织(zǔzhī)中可溶性还原糖的鉴定
1. 实验原理
/mL的硫酸铜溶液混合后，立即生成(shēnɡ chénɡ)淡蓝色的Cu(OH)2沉淀。 Cu(OH)2与葡萄糖、果糖、麦芽糖等可溶性还原糖共热，能够生成(shēnɡ chénɡ)砖红色的Cu2O沉淀。因此，利用该反应，可证明样液中含可溶性还原糖。
CH2OH-(CHOH)4-CHO+2Cu(OH)2→CH2OH-(CHOH)4-COOH+Cu2O↓+2H2O
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2 实验目的(mùdì)
初步掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖的基本方法。
3 实验材料
做可溶性还原糖的鉴定实验，还原糖的含量、生物组织有无色素是影响实验结果(jiē guǒ)及其观察的最重要因素。
因此要选用可溶性还原糖含量高、白色或近于(jìn yú)白色的植物组织，其中以苹果、梨最好，也可用白萝卜替代。
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4 试剂配制
甲液（(qīnɡ yǎnɡ huà nà)溶液）
斐林试剂
乙液（）
甲、乙试剂千万要分开放，不可混合(hùnhé)。在实验过程中，将4-5滴乙液滴入2mL甲液中现混现用！！！
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5 实验(shíyàn)步骤
（1）制备组织(zǔzhī)样液（教师制备）
（2）鉴定(jiàndìng)样液
先在试管中加入2mL组织样液
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再加入(jiārù)2mL刚配制的斐林试剂
水浴(shuǐ yù)煮沸2分钟
注意观察整个实验过程中，溶液颜色(yánsè)的变化！！！
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（二）生物(shēngwù)组织中脂肪的鉴定
1 实验原理
苏丹Ⅲ是可以对脂肪染色的试剂，因此，当含有(hán yǒu)大量油滴的植物细胞用苏丹Ⅲ染色后，在显微镜下可以看到细胞内橘黄色的颗粒。
2 实验目的
初步(chūbù)掌握鉴定生物组织中脂肪的基本方法
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3 实验材料(cáiliào)
做脂肪的鉴定实验时，所用材料(cáiliào)一要脂肪含量高，二要有一定大小才能做徒手切片，花生种子符合该实验的要求。
将花生种子经过3-4小时的浸泡使其变软，有利于切成薄片；但浸泡时间也不宜过长，否则切片时易碎裂，切不成薄片。
4 试剂配制
苏丹Ⅲ溶液：Ⅲ干粉溶于100mL体积分数(fēnshù)为95%的酒精溶液中，待全部溶解后即成。
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5 实验(shíyàn)步骤
（1）切片(qiē piàn)制作
①去掉(qù diào)花生种皮
②用左手的三个手指夹住花生的一片子叶，使花生子叶高于手指之上（为什么？）。右手持刀片，将子叶削去一层，形成平面。
③刀口向内，与花生断面平行，以均匀的动作，自左前方向右后方快速拉刀，滑行切片（注意要整个臂部用力，而不要腕部用力。）如此连续动作，切下一些薄片。
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（2）染色(rǎnsè)
用毛笔将最 薄的几片材料移至洁净的载玻片的中央→滴苏丹Ⅲ溶液2-3滴于花生子叶(zǐyè)薄片上→2-3min后，吸去染液→滴50%的酒精洗去浮色→吸去多余酒精→再滴1-2滴蒸馏水→盖上盖玻片，制成临时装片。
（3）镜检鉴定(jiàndìng)
在低倍镜下观察，找到花生子叶切片的最薄处（最好只有1-2层细胞），移至视野的中心→换用高倍镜观察，调焦至最清晰。可发现细胞内橘黄色的圆形小颗粒，这就是脂肪滴（油滴）。若发现观察物外围也有许多橘黄色小颗粒，则是脂肪跑了出来。
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（三）生物(shēngwù)组织中蛋白质的鉴定
1 实验原理
在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲（H2NOC-NH-CONH2）能与Cu 2+作用，形成紫色的络合物，这个(zhè ge)反应叫做双缩脲反应。
由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此(yīncǐ)，蛋白质都可与双缩脲试剂发生颜色反应。
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