糖、氨基酸和蛋白质的鉴定
糖
一、糖的鉴定
糖类化合物:又称碳水化合物,是多羟基醛或多羟基酮及其缩聚物和某些衍生物的总称,一般由碳、氢与氧三种元素所组成。
实验目的:
(1)进一步了解糖的化学性质;
(2)掌握鉴定糖的方法及其原理
。
(一)a-萘酚试验(Molish)
糖类化合物一个比较普遍的定性反应是Molish反应。即在浓硫酸存在下,糖与a-萘酚(Molish试剂)作用生成紫色环。
实验方法
取3支试管,编号, mL %的各待测糖水溶液,滴入2滴Molish试剂(a-萘酚的乙醇溶液),摇匀。把试管倾斜450,沿管壁慢慢加入约1mL浓硫酸(切勿摇动),小心竖直后仔细观察两层液面交界处的颜色变化。硫酸在下层,试液在上层
样品:葡萄糖、蔗糖及淀粉
样品
葡萄糖
蔗糖
淀粉
滤纸浆
现象
有紫色环
有紫色环
无
无
解释: 糖被浓硫酸脱水生成糠醛或糠醛衍生物,后者进一步与a-萘酚缩合生成紫红色物质,在糖液和浓硫酸的液面间形成紫色环。
(二) Fehling试验
(1)实验原理
Fehling试剂:含有硫酸铜和酒石酸钾钠的氢氧化钠溶液。
硫酸铜与碱溶液混合加热,生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在,则产生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。为防止铜离子和碱反应生成氢氧化铜或碱性碳酸铜沉淀,Fehling试剂中需加入酒石酸钾钠,它与Cu2+形成的酒石酸钾钠络合铜离子是可溶性的络离子。
(2)操作方法
取4支试管,编号,分别加入Fehling试剂I和II 。摇匀并置于水浴中微热后,分别加入5滴待测糖溶液,振荡后置于沸水浴中加热2 ~ 3min,取出冷却,观察颜色变化及有无沉淀析出。
Fehling试剂 I: g硫酸铜溶于100 mL蒸馏水中, 得淡蓝色的
Fehling试剂 I。
Fehling试剂 II:将17g酒石酸钾钠溶于20mL热水中,然后加入20 mL含
5 g NaOH的水溶液,稀释至100 mL得无色透明的
Fehling试剂 II。
样品:葡萄糖、果糖、蔗糖及麦芽糖
样品
葡萄糖
果糖
蔗糖
麦芽糖
现象
蓝色-无色-砖红色沉淀
蓝色-无色-砖红色沉淀
蓝色溶液,一直无现象
蓝色-无色-砖红色沉淀
解释:硫酸铜与碱溶液混合加热,生成黑色的氧化铜沉淀。若同时有还原糖存在,则产生黄色或砖红色的氧化亚铜沉淀。
(三) Benedict试验
(1)实验原理:Benedict试剂是Fehling试剂的改良。Benedict试剂利用柠檬酸作为Cu2+的络合剂。
Benedict试剂: g柠檬酸钠和10 g 无水碳酸钠溶于80 mL水中, g结晶的硫酸铜溶解在10 mL水中,慢慢将此溶液加入上述溶液,用水稀释至100 mL得Benedict试剂。
(2)操作方法
用Benedict试剂代替Fehling试剂重复以上实验,取4支试管,编号,。摇匀并置于水浴中微热后,
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