气相色谱仪使用方法及实验操作步骤.doc

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液相色谱仪、气相色谱仪、原子吸收分光光度计、红外光谱仪、核磁共振、原子发射光谱等分析仪器
气相色谱仪使用方法与实验操作步骤：
     A、打开氮气、氢气、空气发生器的电源开关(或氮气钢瓶总阀)，〔气体发生器一般在出厂时已调整好，不用再调整〕。     B、打开色谱仪气体净化器的氮气开关转到“开〞的位置。注意观察色谱仪载气B的柱前压上升并稳定大约5分钟后，打开色谱仪的电源开关。    C、设置各工作部温度。TVOC分析的条件设置：(a)柱箱：柱箱初始温度50℃、初始时间10min、升温速率5℃/min、终止温度250℃、终止时间10min; (b)进样器和检测器：都是250℃。脂肪酸分析时的色谱条件：(a)柱箱：柱箱初始温度140℃、初始时间5min、升温速率4℃/min、终止温度240℃、终止时间15min; (b)进样器温度是260℃，检测器温度是280℃。     D、点火：待检测器〔按“显示、换档、检测器〞可查看检测器温度〕温度升到150℃以上后，打开净化器上的氢气、空气开关阀到“开〞的位置。。按住点火开关〔每次点火时间不能超过6~8秒钟〕点火。同时用明亮的金属片靠近检测器出口，当火点着时在金属片上会看到有明显的水汽。如果在6~8秒时间氢气没有被点燃，要松开点火开关，再重新点火。在点火操作的过程中，如果发现检测器出口白色的聚四氟帽中有水凝结，可旋下检测器收集极帽，把水清理掉。在色谱工作站上判断氢火焰是否点燃的方法：观察基线在氢火焰点着后的电压值应高于点火之前。     E、打开电脑与工作站〔通道一分析脂肪酸，通道二分析碘〕，打开一个方法文件：脂肪酸分析方法或碘分析方法。显示屏左下方应有蓝字显示当前的电压值和时间。接着可以转动色谱仪放大器面板上点火按钮上边的“粗调〞旋钮，检查信号是否为通路(转动“粗调〞旋钮时，基线应随着变化)。待基线稳定后进样品并同时点击“启动〞按钮或按一下色谱仪旁边的快捷按钮，进展色谱数据分析。分析完毕时，点击“停止〞按钮，数据即自动保存。     F、关机程序：首先关闭氢气和空气气源，使氢火焰检测器灭火。在氢火焰熄灭后再将柱箱的初始温度、检测器温度与进样器温度设置为室温〔20-30℃〕，待温度降至设置温度后，关闭色谱仪电源。最后再关闭氮气。
高效液相色谱
我国药典收载高效液相色谱法项目和数量比拟表：
方法
项目
数量
1985年版
1990年版
1995年版
2000年版
HPLC法
鉴别
9
34
150
检查
12
40
160
含量测定
7
60
117
387
鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。
三、色谱法分类3
四、色谱别离原理3
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II．根本概念和理论5
一、根本概念和术语5
二、塔板理论8
三、速率理论〔又称随机模型理论〕9
III．HPLC系统10
一、输液泵11
二、进样器13
三、色谱柱14
四、检测器17
五、数据处理和计算机控制系统20
六、恒温装置20
IV．固定相和流动相20
一、基质〔担体〕20
二、化学键合固定相22
三、流动相23
1．流动相的性质要求23
2．流动相的选择24
3．流动相的pH值24
4．流动相的脱气25
5．流动相的滤过25
6．流动相的贮存26
7．卤代有机溶剂应特别注意的问题26
8．HPLC用水26
V．HPLC应用27
一、样品测定27
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二、方法研究27
附件：高效液相色谱法〔HPLC〕复核细如此28
一、对起草单位的要求：28
二、对复核单位的要求：28
二、HPLC的特点和优点
HPLC有以下特点：
高压——压力可达150~300 Kg/cm2。色谱柱每米降压为75 Kg/cm2以上。
高速——~ ml/min。
高效——可达5000塔板每米。在一根柱中同时别离成份可达100种。
高灵敏度——紫外检测器灵敏度可达。同时消耗样品少。
HPLC与经典液相色谱相比有以下优点：
速度快——通常分析一个样品在15~30 min，有些样品甚至在5 min即可完成。
分辨率高——可选择固定相和流动相以达到最优别离效果。
灵敏度高——紫外检测器可达，荧光和电化学检测器可达。
柱子可反复使用——用一根色谱柱可别离不同的化合物。
样品量少，容易回收——样品经过色谱柱后不被破坏