遗传学实验果蝇杂交设计书.docx

遗传学实验果蝇杂交设计书
遗传学实验果蝇杂交设计书
一、单因子试验
1、实验原理
分离定律(law of segregation )也称孟德尔 分离定律。一对基因在杂合状态下不互相影响， 各自保持相对的独立性，而在形成配子的时候， 就会互相分开，并按照原样分配到不同的配子中 去。
在一般情况下，配子的理论分离比是 1:1 ,子 二代(F2)的基因型分离比是1:2:1 ,若显性完 全，F2的表型分离比是3:1。杂种后代分离出来 的隐性基因纯合体与原来隐性亲本在表型上是 一样的，隐性基因并不因为和显性基因在一起而 改变它的性质。
单因子杂交是指一对等位基因间的杂交。 野生 型果蝇是长翅(+/+),其长翅超出腹部末端约 1/，只留下少量残迹 (vg/vg),无飞翔能力。
Vg的基因座位于第二 ,。对长翅(+)完全隐性。
用野生型长翅果蝇与残翅果蝇杂交，子一代
(R)全是长翅。子一代系内交配，子二代产 生性状分离，长翅：残翅为 3:1,。
基因型为+/vg (长翅)雌雄均可产生两种配子 +和vg,并且各占1/2,。简单列表可知F2的性状 比为3:1。
表1果蝇杂交实验的配子及双翅形状的遗传
K
F12配予、
E 3配子
1/2 +
1/2 vg
1/2 +
1/4 +/+
1/4 +/vg
的
1/2 vg
1/4 +/vg
1/4 vg/vg
残翅
2、实验步骤
(1)确定杂交亲本，挑选处女蝇。
选用2#与18#为亲本进行杂交实验。
选用野生型长翅和突变型残翅果蝇为杂交亲 本。雌蝇一定要选处女蝇。处女蝇的挑选方法： 亲本饲养2周之后，提前10—12小时把培养瓶 内所有活的成虫倒干净，然后在倒掉成虫的
12
小时内吧新羽化的成虫倒出来，装进消毒过的培 养瓶或者平底试管进行适度麻醉，麻醉后放在消 毒过的白瓷板或者硬纸板上把雌雄蝇分别挑出, 雌蝇即为处女蝇。根据实验所需处女蝇数量的多 少，可连续收集，但不要超过 3天。
(2)配好杂交组合，进行正、反杂交。
正交组合：野生型长翅(?)X突变型残翅
(Mo用消毒过的毛笔把3—4只长翅处女蝇扫 入培养瓶中，然后把培养瓶水平放置，一面麻醉 状态下的果蝇沾到培养基或水珠而被闷死，随机 用同样方法扫入3—4只残翅雄蝇，塞紧棉塞， 贴好标签，保持水平直至果蝇苏醒后放入 25 c
恒温培养箱中培养。
反交组合：将亲本性别交换。
(3)培养7天之后把亲本果蝇成虫全部倒出来 处死。
(4)再过7天F1成蝇出现，把F1成蝇转移到 经过消毒的空瓶子里进行适度麻醉，观察 F1翅 形的变化，并把结果记录。把5〜6对适度麻醉的 F1转入另一培养瓶，标明信息。
表2正、反交Fi果蝇翅形观察结果记录表
\观
统日
期 \
长翅星X残翅台
残翅星X长翅台
长翅数
残翅数
长翅数
残翅数
合计
(5)过7天，F1成虫倒出处死，培养基继续培
(6)过7天，F2成虫出现，开始观察，可以 连续观察7天左右，往后可能有F3成虫出现， 所以观察时间不要超过8天。记录数据，观察过 的成虫集中处死。表3正、反交F2果蝇翅形观 察结果记录表
\ 观 察茸果 统井、日 期\
长翅星X残翅台
残翅星X长翅台
长翅数
残翅数
长翅数
残翅数
合计
(7)处理数据，并进行卡方检验，来确认是否 符合理论猜测比值。
表4实验结果x 2测验表
观察结 果
长翅(+)正 交、反交合并
残翅(vg)正 交、反交合并
合计
实验观 察数(O)
预期数
3:1 (C)
偏差
(O-C)
(O-C)
2/C
3、实验预期结果
F1全部为长翅果蝇，而且正反交结果一样。
F2出现翅形的性状分离，并且数量比大约 符合长翅：断翅为3:1 ,且正反交结果类似。通 过卡方检验证明实际分离比与理论分离比一致。
二、两对基因自由组合实验
1、实验原理
由非同源染色体上的两对等位基因所决定的
两对相对性状，在杂种第二代是自由组合的。根 据孟德尔第二定律，一对基因的分离与另一对
(或者另几对)基因的分离是独立的。一对基因 所决定的性状在杂种第二代是 3:1 ,两对不连锁 的基因所决定的形状，在杂种第二代就呈
9:3:3:1 ,黑檀体果蝇（e）的体色乌黑，e的基 ;与e相对应的野生 型性状是体色灰黄。残翅果蝇（vg）的双翅几乎 没有，只能看到少量残迹，vg的基因座位于2