多酚芥子碱植酸的测定.doc

总酚、芥子碱的测定
总酚标曲的制定
取25mg单宁（烘干后重）溶于100ml甲醇溶液中，分别去0μl、20μl、40μl、60μl、80μl、100μl放于玻璃试管中，加入1ml蒸馏水，-福林酚试剂（1：2），加入5ml总酚、芥子碱的测定
总酚标曲的制定
取25mg单宁（烘干后重）溶于100ml甲醇溶液中，分别去0μl、20μl、40μl、60μl、80μl、100μl放于玻璃试管中，加入1ml蒸馏水，-福林酚试剂（1：2），加入5ml 10% na2co3，混匀静置20min,720测OD值。
总酚样品的测定
()样品于离心管中，，混合器30min,30℃离心30分钟（4500转/min），离心后，取混合上清液100μl于试管中，加蒸馏水1ml, -福林酚试剂（1：2），加入5ml 10% na2co3,摇20min, 720测OD值,蒸馏水做对照。（芥子碱样品于330nm处测定吸光度值）
计算
X1%=×V×10-3/m
V–吸光度值标准曲线所查对应体积μl
M-样品质量
植酸的测定（定磷法）
标准曲线的绘制
磷酸二氢钾在105℃干燥1h,，定量地转至1000ml容量瓶中，加硝酸3ml,用水稀释至刻度，摇匀，即为50μg/ml的磷标准溶液。
、、2。0ml、、、，各加入钒钼酸铵显色剂10ml,用水稀释至刻度，摇匀，常温下放置10min以上，，用1cm比色皿，在400nm波长下用分光光度计测各溶液的吸光度。以磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制工作曲线。
操作步骤
干灰化法：（m3）制备好的试样于灰化坩埚中，,在电炉上炭化，直至样品无烟。再放入高温炉，550℃灰化3h,取出冷却，加入10ml(1:1)盐酸溶液和硝酸数滴，小心煮沸约10min,冷却后转入100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。
游离磷：(m4)制备好的试样于三角