室内空气中细菌的测定室内空气中细菌的测定————平皿暴露沉降法平皿暴露沉降法 1 目的: ?学皿暴露沉降法测定公共场所空气中细菌的总数。?评价居室的卫生状况 2 理论依据和实际应用: 室内空气中的微生物主要来源是人们在室内的生活和活动,使微生物随飞沫与悬浮颗粒物飞扬于空气中。所以室内空气中的微生物数量的多少取决于室内卫生状况、居住密度、居民健康情况、人们的活动情况、室内通风效果等。居住密度大、活动频繁、通风不良时,细菌总数就多。所以它可以代表居室一般卫生状况的意义; 3 理论依据和实际应用: 附着于室内悬浮颗粒物和唾液与痰液飞沫的微生物中含有一定数量的致病微生物(溶血性链球菌、结核杆菌、白喉杆菌、肺炎球菌、金黄色葡萄球菌、流感病菌等), 可对人致病(在空气湿度大、通风不良、阳光不足的情况下,可保持较长的生存时间和致病性),因此,有必要对室内空气中的微生物数量作出限制。以病原体作为直接的评价指标,在技术上还有一定难度,所以目前仍多用细菌总数作为居室空气细菌学的评价指标。 4 三、原理: 空气中附着于尘埃或飞沫小滴上的细菌,经过一段时间,可自然沉降于培养基的表面上,经培养后,计数其生长的菌落数,再按公式推算出每立方米空气中的细菌数。 5 四、实验准备: (一)仪器与设备: ?高压蒸汽灭菌器?电热恒温干燥箱?恒温培养箱?电冰箱?玻璃平皿及制备培养基用的一般设备 6 (二)试剂与材料: 营养琼脂培养基: (1)成份: 蛋白胨 10 克牛肉浸膏 3克氯化钠 5克磷酸二氢钠 1克琼脂 15 ~ 20 克蒸馏水 1000 毫升 7 (二)试剂与材料: 营养琼脂培养基: (2)制法:将上述成分混合后,加热溶解。调节 PH 值 ~ 。过滤除去沉渣,分装于三角烧瓶中,经 121 ℃( 103kPa )高压蒸气灭菌 20 分钟, 然后倾注适量( 15 ~ 20 毫升)于已灭菌处理的平皿内, 制成营养琼脂平板备用。若当天不用,应置冰箱内保存。 8 五、操作步骤: (一)制作营养琼脂平板(无菌操作) ?操作者面前点燃酒精灯?打开已灭菌处理的平皿?倾注适量营养琼脂培养基( 15~20毫升) ?冷凝(大约 15分钟) 9 (二)选择采样点的要求: ,以期能正确反映室内空气污染物的水平。原则上小于 50 ㎡的房间应设( 1~3)个点; 50 ㎡~ 100 ㎡设(3~5)个点; 100 ㎡以上至少设 5个点。在对角线上或梅花式均匀分布。 ,离墙壁距离应大于 。 :原则上与人的呼吸带高度相一致。相对高度 ~ 之间。 10
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