实验八：血液样品的处理及组织样品的制备课件.ppt

实验五:血液生化样品处理及组织样品的制备目的要求?了解血液生化样品制备的原理; ?掌握血液生化样品制备的方法(无蛋白血滤液制备方法)。一、血液生化样品制备?采血 测定用的血液,多由静脉采集。一般在饲喂前空腹采取,因此时血液中化学成分含量比较稳定。采血时所用的针头、注射器、盛血容器要清洁干燥;接血时应让血液沿着容器壁慢慢注入,以防溶血和产生泡沫。血清的制备?血清:全血不加抗凝剂自然凝固后析出的淡黄色液体。?血清的制备:由静脉采集的血液,注入清洁干燥的试管或离心管中。将试管放成斜面,让其自然凝固,一般经 3h 血块自然收缩而析出血清;也可将血样放入 37 ℃恒温箱内,促使血块收缩,能较快的析出血清。为了缩短时间,也可用离心机分离(未凝或凝固后均可离心),分离出的血清,用滴管移人另一试管中供测定用,如不及时使用, 应贮于冰箱中。分离出的血清不应溶血。全血及血浆的制备?全血:采血前加入抗凝剂,包括了血浆和血纤蛋白。?血浆:全血离心后除去血纤蛋白的液体。?抗凝剂:凡是能抑制血液凝固反应的化合物称为抗凝剂。常用抗凝剂的使用方法?1、草酸钾(钠)。其优点是溶解度大,与血液混合后,迅速与血中钙离子结合,形成不溶的草酸钙,使血液不再凝固。?配制方法:通常先配成 10 %草酸钾或草酸钠溶液,然后吸取此液 于试管中,转动试管,使其铺散在试管壁上,置 80 ℃干燥箱内烘干,管壁呈白色粉末状,加塞备用。每管含草酸钾或草酸钠 10mg ,可抗凝血液 5ml 。?应用范围:适用于非蛋白氮、血糖等多种测定项目,但不适用于钾、钠和钙的测定;另外草酸盐能抑制乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶和淀粉酶,故使用时给予注意。草酸钾一氟化钠混合剂。?血液内某些化学成分(如血糖)离开机体后仍易被酶作用而影响测定结果。如用混合剂可抑制酶的作用(氟化钠有抑制糖酵解作用),因而能防止血糖等化学物质的分解。?配制方法:称取草酸钾 6g ,氟化钠 3g ,加蒸馏水至 lOOml ,分装在试管内,每管 。 80 ℃烘干后加塞备用。每管含混合剂 ,可抗凝血液 5ml 。?应用范围:最适用于血糖的测定,而不适用于脲酶法的尿素氮测定(因氟化钠能抑制脲酶活性)。肝素?是一种较好的抗凝剂,因它对血中有机成分和无机成分的测定均无影响,其主要作用是抑制凝血酶原转变为凝血酶,使纤维蛋白原不能转化为纤维蛋白而凝血。?配制方法:常将肝素配成 lmg / ml 的水溶液,每管装 0. 1ml ,再横放蒸干(不宜超过 50 ℃)备用。每管可抗凝血液 5~ lOml 。?市售肝素大多数为钠盐,可按 10mg / ml 配制成水溶液。每管装 ,按上法烘干,可使 5~ lOml 血液不凝固。?应用范围:适用于血液有机物的测定;不适用于凝血酶原的测定。乙二胺四乙酸二钠盐(简称 EDTANa2) ? EDTANa2 对血液中钙离子有很大的亲和力, 能使钙离子络合而使血液不凝固。?配制方法:常配成 40mg / mlEDTANa2 水溶液,每管分装 ,在 80 ℃干燥箱内烘干备用。每管可抗凝血液 5ml 。?应用范围:适用于多种生化分析,但不适用于血浆中含氮物质、钙及钠的测定。血浆的制备?血浆的制备由静脉采集的血液,放人装有抗凝剂的试管或离心管中,轻轻摇动,使血液与抗凝剂充分混合,以防小血块的形成。抗凝血可静置或离心沉淀分离(2000r / min,10min) ,以使血细胞下沉,上清液即为血浆。血浆与血清成分基本相似,只是血清不含纤维蛋白原。