生物化学化学重点知识总结
生物化学化学重点知识总结
物理化学重点知识总结
第一节课
1:还原糖的测定(使用斐林试剂或本立德)
斐林试剂成分:硫酸铜、氢氧化钾、酒石酸钾钠(或柠檬酸钠)糖类在碱性溶液中的还原作用常被利用来作为还原糖的酸(成不溶盐),含硫乙醇(破坏-S-S-)
⒁变性后性质变化及原因:溶解度下降(高级紊乱、水膜破坏),颜色变(三级破环内外基团换位),变性后才可被酶水解(蛋白酶只破坏肽键);黏度增大(面粉)⒂复性:变性逆过程
⒃化学性质:双缩尿反应(与肽键反应,多肽、蛋白质反应,成蓝紫色)茚三酮反应(与-NH2)
专一切断(CNBr:专一切Met羧基端肽键;胰蛋白酶:专一切赖精羧基形成的
肽键)
N端分析(Sanger)C端分析(羧肽酶解靠近羧基端氨基酸放出多)
++⒄调节:异构化(-S-S-与-SH还原性),修饰,波尔效应(HbH+O2HbO2+H,酸性不利于结合O2)【一个血红蛋白与四个O结合】
五、酶
①本质:Pro.&RNA(P酶,R酶)
②P酶命名:传统(胃蛋白酶);EC[(ECabcd),a(123456)六类:(氧转水裂异合)]R酶命名:EC[a:1-分子间催化,2-分子内催化](加后缀-ase)③全酶:酶蛋白+辅因子(酶蛋白--底物专一性,辅因子---反应类型专一性;,一个辅因子对应多个Pro.)【全酶才有活性】④辅因子:辅基辅酶(共价键稳辅基;疏水作用不稳辅酶),化学本质(金属离子R+、有机小分子V),作用机制(R+升降价参与氧化还原反应;R+静电作用力参与定向效应)⑤活化中心:必需基团;结合部位;催化部位;调控部位;酶元无活性原因(活化中心未形
成或暴露)
⑥专一性:绝对锁钥学说;相对(键、族)--表面诱导契合学说;几何
⑦高效性(催化机理):过渡态机制(核心);邻近效应;定向效应;亲核共价;OH⑧酶与底物主要作用力是静电作用力:(低介电常数介质中静电屏蔽少,酶活性强;静电作
用力>氢键>疏水作用力)
⑨多底物催化机理:依次反应(易反应的优先);随机释放产物;乒乓反应(反应前部分产
物释放)
⑩调节性:T、PH、[S]、激活剂,抑制剂(定义);别构(变构酶不合米氏方程),共价修饰,同工酶【功能同(催化同一反应),理化性质不同】
-⑾动力学:米氏方程【V=Vmax[S]/(Km+[S]);应用(Km与[S]关系)】;Km=(k2+k3)/k1的意义【Km越小,酶与底物结合能力越强】、求法(双倒数法);Km和Vmax是物理常量⑿抑制剂动力学:可逆不可逆可除不可除,原因(是否共价键与活化中心结合)三可逆抑制剂Km、Vmax变化(竞争抑制剂-与活化中心结合;-非竞争性抑制剂-与非活性中心结合)
⒀活力测定:单位(IU、Kat),比活力(酶活力/Pro(RNA)mg数),转换数(kp),催化周期
(T=1/kp);初速率V=反应5%内的速率
⒁RNA酶(核酶):定义、分类【剪切-1(锤头/发夹/丁肝病毒核酶),剪接-2】⒂失活作用,抑制作用,去激活作用的区别⒃几种抑制剂()
⒄抑制度表示法:相对活力分数(未失活/总);抑制分数(失活/总)⒅竞争抑制:[S]↑→抑制↓
⒆非竞争抑制:[S]与抑制强弱无关
⒇竞争性抑制非竞争性抑制
六、核酸
①含元素
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