BD流式细胞仪.docx

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目录
简介流式细胞仪⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3
流式细胞仪的临床检验工程
淋巴细胞亚群分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4
肿瘤细胞DNA检测分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯胞核，PI和DNA缄基对特异结合后上机检测PI的荧光强度，并
进展数据分析。
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流式细胞仪采购建议书2005年
应用实例：乳腺癌病人的手术标本分析图。
*其中红色群体为二倍体，黄色群体为异倍体。
3、白血病和淋巴瘤免疫分型
正常白细胞在其分化过程中，随着系列的不同、成熟阶段的差异，会在细胞膜外表表
达不同的分化抗原。白血病细胞那么在癌变的过程中，丧失了正常细胞底系列专一性和分
化阶段规律性，在本质上有别于正常骨髓细胞。应用此特点可进展免疫表型分析，以鉴
别各种白血病和淋巴瘤，辅助临床诊断、评估疗效和预后。
常用的抗原包括：CD3、CD5、CD7、CD19、CD20、CD22、CD10、HLA-DR、
CD13、CD14、CD33、CD34、GLY-A、MPO等等。
应用实例：利用CD45三色分析急性髓性白血病。
*左图为正常骨髓，绿色为正常淋巴细胞，深红为单核细胞，玫瑰红为成熟粒细胞，浅蓝为有核
红细胞，深蓝为未成熟细胞；右图为急性髓性白血病图形，可见与正常明显的差异。
4、剩余白血病检测
剩余白血病是指经过适当的治疗、疾病缓解后仍残留在病人血中的极少量白
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血病细胞。通常白血病病人经过化疗后的疾病复发率为60-80%，经过自体或异体骨髓移
植后的复发率仍偏高〔20-50%〕。所以如果能早期检测到复发的迹象，即白血病细胞的
再增生，那么可以提前给予病人及时恰当的治疗。
依照不同的白血病，选用不同的抗体组合〔如下表〕来检测剩余白血病。流式细胞术
可在一万个骨髓细胞中检测到一个白血病细胞；尤其是TdT的应用大大提高了检测灵敏
度。
白血病种类可选择的抗体组合
T-ALLcytoCD3/TdT
B-ALLCD13/TdT，CD33/TdT
Pre-B-ALLcytoμ/TdT
AMLCD13/TdT，CD33/TdT，
CD7/TdT
5、网织红细胞分析
网织红细胞计数是骨髓红细胞造血功能的重要指标。传统手工计数耗时耗力，缺乏准
确性。流式细胞仪网织红细胞计数系统由于采用系统试剂与全自动软件，可在短时内分
析大量细胞，低水平网织红细胞也可到达统计分析精度，省时省力，结果正确可靠。
*左图中红色群体为红细胞，右图利用RNA染料噻唑橙〔TO〕区分成熟红细胞和网织红细胞。
6、造血干祖细胞检测
在治疗恶性血液病时，大剂量化疗或放疗摧毁有病的骨髓后，干细胞移植保证了安康
的干祖细胞重建骨髓，产生正常的血细胞，实体肿瘤病人亦可通过干细胞移植抗衡大剂
量化疗导致的致死性血液毒性。与大剂量化疗相配合的干细胞移植已在临床大大提高了
某些肿瘤病人的长期存活率，如乳腺癌、儿童神经母细胞瘤、卵巢癌等。另外，干细胞
移植与再生障碍想贫血、免疫缺隐、血红蛋白病等非恶性造血系统疾病治疗的相关性也
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正在研究中。
*上图中红色群体是经过多参数设门后准确设定的CD34阳性细胞群体，绿色局部是进展定量计数
的标准微球。
7、血小板疾病及活化血小板检测
通过血小板膜糖蛋白的检测可以诊断先天性或获得性血小板疾病如Bernard-Soulier
综合征〔CD42b-42a〕，血小板无力症〔CD41-CD6〕1，免疫性血小板减少等等。
评价血小板活化程度的应用领域包括：缺血性冠状动脉疾病如心绞痛、心肌梗死、血
管成形术、心肺旁路术等；缺血性脑血管病如脑堵塞、TIA、脑动脉硬化等；糖尿病；恶
性肿瘤；高血压病；高脂蛋白血症；高粘滞血症；抗血小板药物机制研究与疗效监测；
吸烟；情绪性应急等。
应用实例：CD61/CD62P/PAC-1三色标记分析血小板活化。
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8、HLA-B27检测
由流行病学统计结果显示，HLA-B27基因型阳性的人患数个遗传性免疫疾病的机率，
比一般人要高很多，以强直性脊柱炎为例，约为87倍。因此HLA-B27检测可以有效帮助
临床鉴别诊断强直性脊柱炎等血清阴性骨关节疾病。其他相关性疾病有：遗传性关节炎
如Reiter’综s合征,反响性关节炎，肠性关节炎等。
检测时选用CD3/HLA-B27双标记抗体，圈定T淋巴细胞亚群，再分析其细胞外表是否
表现HLA-B27组织抗原。因为T细胞外表只表达Clas