墨兰离体快繁研究.pdf

收稿日期:2002210212基金项目:中国森林生态网络体系“线”的研究与示范(2002BA516A15)作者简介:项艳(1965—),女,安徽桐城人,副教授,,16(4):434~438ForestResearch文章编号:100121498(2003)0420434205墨兰离体快繁研究项艳1,於凤安1,彭镇华2(,安徽合肥230036;,北京100091)摘要:采用墨兰的茎尖和芽为外植体,研究墨兰的组织培养要点。通过对墨兰组织培养中外植体的选择、芽的诱导、继代增殖、壮苗培养、生根诱导和移植进行研究,运用正交试验筛选出芽快速生芽的最佳培养基为:MS+·L-1+·L-1+琼脂8g·L-1+蔗糖30g·L-1,生根的最佳培养基为:1/2MS+·L-1。,,叶数为2~3条的兰花苗有利于生根。关键词:墨兰;芽的诱导;继代增殖;生根诱导;移植中国分类号:S72213+7文献标识码:A中国兰花,通常是指兰属(Cymbidium)植物中一部分地生种。中国兰以香气馥郁,色彩淡雅,花姿优美,叶态飘逸见长,是庞大兰科家族中独特且稀少的种属。中国兰沿用传统的分株繁殖法,繁殖系数极低,常规情况下种子不完全,极难萌发,因此世界上多采用组织培养来繁殖种苗[1]。我国台湾省和东南亚一些国家利用组织培养对蝴蝶兰(Phalaenopsisspp.)进行了工厂化生产,获得了较大的经济效益[2]。近年来笔者从国内引进墨兰(Cymbidiumsinense(Andr.)Willd.)优良品种,利用茎尖和腋芽为外植体开展墨兰组织培养[3],较系统地研究了墨兰的组织培养和试管苗生产技术,为墨兰遗传资源的保存和开发利用及其工厂化生产提供参考。[4]。~13cm的新芽,从植株茎部切离,用利刀除去根、脏物和外包叶2~3片,充分洗净后将材料再切取2~3cm,在10%次氯酸钠药液中消毒10min,灭菌后用无菌水冲洗数次,再放到灭菌滤纸上吸干水份,然后在解剖镜下无菌操作剥取茎尖和腋芽,一般茎尖大于2mm,带2个原叶基,接种到培养基中。~25℃的黑暗条件下,培养1~2个月后可分化出1至数个乳白色的类原球茎,类原球茎的增殖应在转绿前,将其切割成小块,或给予针刺等损伤,转入类原球茎增殖培养基上以繁殖更多的类原球茎;或放在液体培养基中,在旋转培养床上进行旋转培养,在其小块组织稍为长大后,转接到分化培养基上,分化芽和根。+62BA3mg·L-1+NAA1mg·L-1培养基中,诱导芽的发生,将诱导出的芽接种在附加生长素和分裂素的不同浓度配比的培养基上,、、·L-1,、、·L-1,进行双因素正交试验,观察芽的分化状况,筛选最佳培养基。,分别是:(1)1/2MS+·L-1+·L-1;(2)1/2MS+NA