PCR室室内质控标准操作程序.doc

PCR室室内质控标准操作程序
控制实验的重复性、精密度，并检测其准确度的改变，提高本室常规工作中的批间、批内标本检测的一致性。
2. 适用范围 本程序适用临床基因扩增检验质量负责人和检验人员对DNA和RNA分析的室内质量的变换等。在找原因时，应重点注意“漂移”前后发生了那些变动的因素。
b）趋势性变化：向下或向上的趋势性变化表明检测的准确度发生了渐渐地变化。这种变化往往是由于一个逐渐改变的因素造成的。如质控血清的降解，试剂效价的降低等。
c)连续多点分布在靶值一侧：目前，一般认为质控血清的检测结果连续6天以上出现在靶值同一侧，则应迅速查找原因，争取尽快使之回复围绕在靶值随机分布的状态。因为按照统计学原理，由纯随机误差造成的这种情况的可能性很小。％。因此凡出现连续6天以上出现在靶值同一侧者均有可能存在非随机误差因素。如结果与靶值偏离并不太大，不会给临床使用带来太大影响时，一般化验报告可以照常填发。
d)其他规律变化：（周期性等）
，消除误差来源
a)每个月的月底将该月的全部质控血清检测结果的X和s与该批测定的X和s 进行比较。如果X发生了变化，说明准确度发生了变化提示有非随机误差存在。如果当月s不同侧表明检测的精密度发生了变化。
b)将使用同一批号质控血清的CT值的X和s按月份列出。如果X逐在月上升，应考虑保存不当造成的试剂效价降低或质控血清本身出现降解。如果各月份X基本一致而s逐月加大，则主要提示常规工作的精密度下降，应重点从操作、管理上找原因。
：当阳性对照呈假阴性或阴性质控呈假阳性时为失控；当阳性标本呈假阴性或阴性标本呈假阳性时为失控。此次实验结果不合格，报告室主任，会同有关人员，查找原因，妥善解决，并将失控情况、查找过程及处理结果等详细记录。
：
、B为假阳性时，则应考虑为：；b. 扩增产物的“污染”。可作以下实验鉴定：取4个空管打开静置于标本制备区60分钟，然后加入扩增反应混合液同时以水替代核酸样本进行扩增，如为阳性，而上述仅含扩增反应混合物的管为阴性，即可排除试剂污染的可能，表示实验室有扩增产物“污染”。此时，应立即报告实验室负责人，然后先暂时停止PCR实验，采取各种有效的消毒清洁工作直至产物污染彻底消失后才可进行PCR实验。如果有试剂污染时，应更换另一批号的试剂进行重复实验，待重复实验阴性质控品无失控后，方可报告结果。
，则应判断为实验操作过程中所致的标本间的交叉“污染”，出现这种情况很大程度上属于偶然误差，具体地说，如强阳性的标本气溶胶经加样器所致的污染，强阳性标本经操作者的手所致的污染、使用的离心管核酸提取时在较高温度温育时盖子崩开。因此在PCR实验前离心管、滤心吸头的质检以及在实验中一发现手套可能有污染就立即更换手套显得尤为重要，并且PCR实验人员的严格按照操作程序进行实验的工作态度是实验成败的关键。
：
：
：可更换新的临界对照品，进行重复实验，如果对照品无失控则表示上次实验的临界对照品已失效，