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生物化学实验指导.docx


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第一部分
生物化学与分子生物学概论
本部分的内容为生物化学实验中所涉及的主要原理。介绍如何正确记录实验过程及书写
实验报告的一般规则,是训练学生进行正规实验寻林的重要内容。普通实验技术包合点°无色液读取数据是溶液弯月面最低点水平线与刻度线重合点。
2 .吸量管
可准确地量取溶液的体积。
(1)分类:常用分三类:
①奥氏吸量管:准确量取 0.5毫升、l毫升、2毫升液体时用。每根吸量管上只有一个刻度,
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放液时必须吹出量后残留在吸量管尖端的液体,主要用于量取粘滞系数大的液体。
②移液管:准确量取5毫升、10毫升、25毫升等较多体积液体时用。 每根吸量管上只有一个
刻度,放出液体后,将吸量管尖在容器内壁上继续停留 15秒,注意不要吹出尖端最后的部分。
③刻度吸量管:供量取10毫升以下任意体积的液体时用。 分全流出式与不完全流出式。 全流
出式:一般包括尖端部分, 欲将所量取液体全部放出时, 须将残留管尖的液体吹出。 此类吸量
管的上端常标有吹字。
不完全流出式:若吸量管上端未标有吹字样,则残留管尖的液体不必吹出 o其刻度不包括吸
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量管的最后一部分。
2)吸量管的使用①选择:使用前先根据需要选择适当的吸量管,刻度吸量管的总容量最好等于或稍大于最大
取液量。临用前要看清容量和刻度。
②执管:用拇指和中指(辅以无名指) ,持吸量管上部,用食指堵住上口并控制液体流速,刻
度数字要对向自己。
③取液:用另一只手捏压橡皮球,将吸量管插入液体内(不得悬空,以免液体吸入球内) ,
用橡皮球将液体吸至最高刻度上端 l~2cm处,然后迅速用食指按紧管上口,使液体不致于从
管下口流出。
④调准刻度:将吸量管提出液面,吸粘性较大的液体(如:全血、血清、血浆)时;先用滤
纸擦干管尖外壁, 然后用食指控制液体缓慢下降至所需刻度 (此时液体凹面, 视线和刻度应在
同一水面上),并立即按紧吸量管上口 o
⑤放液:放松食指,使液体自然流入受器内。放液时,管尖最好接触受器内壁。但不要插入
受器内原有的液体中,以免污染吸量管和试剂。
⑥洗涤:吸血液、血清等粘稠液体及标本(尿液)的吸量管,使用后要及时用自来水冲洗干
净。吸一般试剂的吸量管可不必马上冲洗, 待实验完毕后再冲洗。 冲洗干净,最后用蒸馏水冲
洗,晾干备用。
3. 容量瓶
用于配制一定浓度标准溶液或试样溶液。颈上刻有标线,表示在 20℃,溶液装至标线的容
积。有10、25、50、100、250、500、1000、2000毫升几种规格,并有白色、棕色两种颜色。
使用方法:使用前应先检查容量瓶的瓶塞是否漏水,瓶塞应系在瓶颈上,不得任意更换。
瓶内壁不得挂有水珠, 所称量的任何固体物质都必须先在小烧杯中溶解或加热溶解, 冷却至室
温后,才能转移到容量瓶中。
量筒
量简是用来量取要求不太严格的溶液体积的。在配制要求不太准确的溶液浓度时,使用量
筒比较方便。它有从5~2000ml十余种规格。用量筒量取液体体积是一种粗略的计量法, 所以,
在使用中必须选用合适规格, 不要用大量筒计量小体积, 也不要用小量筒多次量取大体积的溶
液。读取刻度的方法与容量瓶和滴定管相同。
(四)一般操作法

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样品与试剂的混匀是保证化学反应充分进行的一种有效措施。 为使反应体系内各物质迅速
地互相接触,必须借助于外加的机械作用。 混匀时须防止容器内液体溅出或被污染, 严禁用手
指直接堵塞试管口或锥形瓶口振摇。溶液稀释时也须混匀。混匀的方法通常有以下几种:
⑴搅动混匀法:适用于烧杯内溶液的混匀。如固体试剂的溶解和混匀。搅拌使用的玻璃棒必须两头都圆滑,棒的粗、细、长、短必须与容器的大小和所配制的溶液的多少呈适当的比例关
系。搅拌时必须使搅棒沿着器壁运动,以免搅入空气或使溶液溅出。倾入液体时必须沿着器壁慢慢倾入,以免产生大量气体,倾倒表面张力低的液体更要缓慢仔细。研磨配制胶体溶液时,搅棒沿着研体的一个方向进行,不要来回研磨。
⑵旋转混匀法:适用于锥形瓶;大试管内溶液的混匀。手持容器使溶液作离心旋转.以手腕,肘或肩作轴旋转。
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⑶指弹混匀法:适用于离心管或小试管内溶液的混匀。 左手持试管上端, 用右手指轻轻弹动
试管下部,或用一只手的大拇指和食指持管的上端, 用其余三个手指弹动离心管, 使管内的液
体作旋涡运动
⑷振荡混匀法:适用振荡器使多个试管同时混匀,或试管置

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  • 上传人森林书屋
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  • 时间2022-03-07