叶绿素的测定.doc

叶绿素a的测定
叶绿素是植物光合作用中的重要光和色素。通过测定浮游植物叶绿素，可掌握水体的初级生产力情况。在环境监测中，可将叶绿素a含量作为湖泊营养化的指标之一。

可根据工作的需哟进行分层采样或混合采样。湖泊、水叶绿素a的测定
叶绿素是植物光合作用中的重要光和色素。通过测定浮游植物叶绿素，可掌握水体的初级生产力情况。在环境监测中，可将叶绿素a含量作为湖泊营养化的指标之一。

可根据工作的需哟进行分层采样或混合采样。湖泊、水库采样500毫升、池塘300毫升，采样量视浮游植物分布量而定，若浮游植物数量较少，也可采样1000毫升。采样点及采样时间同浮游植物。
水样采集后应放在阴冷处，避免日光直射。最好立即进行测定的预处理，如需经过一段时间（4--48小时）方可进行预处理，则应将水样保存在低温（0--4°）避光处。在每升水样中加入1%碳酸镁悬浊液1毫升，以防止酸化引起色素溶解。水样在冰冻情况下（-20°）最长可保存30天。
仪器设备
分光光度计
真空泵
离心机
乙酸纤维滤膜（）
抽滤器
组织研磨器或其他细胞破碎器
碳酸镁粉末
90%丙酮
试验程序
以离心或过滤浓缩水样，在抽滤器上装好乙酸纤维滤膜。倒入一定量体积的水样进行抽滤，抽滤时负压不能过大（约为50kpa）。水样抽完后，继续抽1--2分钟，以减少滤膜上的水分。如需短期保存1--2天，可放入普通冰箱冷冻，如需长期保存（30天），则应放入低温箱保存（--20°）。
取出带有浮游植物的滤膜，在冰箱内低温干燥6--8小时后放入组织研磨器中，加入少量碳酸镁粉末及2--3毫升90%丙酮，充分研磨，提取叶绿素a。用离心机（3000--4000r/min)离心