CCK-8中文说明书.pdf

CCK-8中文说明书.pdfCCK- 8在避光0- 5℃的条件下可以存放1年,在- 20℃条件下可以贮藏更久。反复解冻和冷冻会增加背景值,干扰实验测定。如需经常使用请将试剂存放在0-5℃的条件下。- 8试剂时速度要快,减少试剂在移液器上的 残留。K- 8试剂和培养基充分混匀,建议在加 入CCK- 8试剂后轻轻振摇培养板。为了避免加样时由 于CCK- 8试剂在枪头上的残留所带来的误差,可以在 K- 8试剂并混匀后加样。K- 8试剂中的WST?- 8会与还原剂反应生成WST?- 8甲臜,如果实验中有还原剂,,即在不含细胞的培养基中加入药物,K- 8试剂在一定时间内检测,和不加药物的培养基进行比较(K- 8试剂),,则说明有反应。,培养基颜色发生变化或pH发生 变化,K- 8试剂。含 有酚红的培养基不影响本试剂盒做细胞活性的测定。,建议设定600 nm (或 600 nm以上) 作为参比波长,。K- 8试剂对细胞的毒性非常低。它和活细胞内的脱氢酶持续反应使溶液颜色不断加深,(注:活细胞内的脱氢酶是持续产生的) 。另外,其他的实验,例如中性红法或结晶紫法,K- 8法检测完后继续进行。,建议先做一个标准曲线( “制作标准曲线”)。1. 第一次做实验时,建议先做几个孔摸索接种细胞的数 K- 8试剂后的培养时间。,以避免细胞沉淀下 来,导致每孔中的细胞数量不等,可以每接种几个孔 就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发,为 了减少误差,建议培养板的四边每孔只加培养基,而 不作为指标检测孔。。一般情况下,白细胞较难显色,K- 8反应时间或增加细胞数量(~105个细胞/孔)。悬浮细胞与贴壁细胞相比较难显色。对于悬浮细胞,K- 8培养1- 4小时后,可先从培养箱中取出,目测染色程度或用酶标仪测定决定。若显色困难,可将培养板放回培养箱,继续培养数小时后再确定。K- 8的培养时间一般为1- 4小时,但在培养30分钟左右即可取出肉眼观察显色程度(根据细胞种类而定,需要摸索一下条件)。K- 8的最佳反应时间以具体显色的最佳时间为准。,可以减少平行孔间的差异。K- 8试剂时,建议斜贴着培养 板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,。1 2345678910细胞增殖-毒性检测试剂盒——细胞增殖实验和细胞毒性实验(100孔,500孔,1,000孔,3,000孔以及10,000孔的规格)请在使用前仔细阅读本说明书Cell Counting Kit-8 (CCK-8)注意事项:- 100 孔: 1 ml x 1 管- 500 孔: 5 ml x 1 瓶- 1,000 孔: 5 ml x 2 瓶- 3,000 孔: 5 ml x 6 瓶- 10,000 孔:100 ml x 1 瓶试剂内含10 ml、100-200 ml以及多通道移液器带有450 nm滤光片的酶标仪96孔培养