2.1土壤酸性磷酸酶活性测定.doc

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土壤酸性磷酸酶活性测定
土壤有机磷转变受多种因子限制，特别是磷酸酶的参加，可加速有机磷的脱磷速度。

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土壤酸性磷酸酶活性测定
土壤有机磷转变受多种因子限制，特别是磷酸酶的参加，可加速有机磷的脱磷速度。在pH4-9的土壤中均有磷酸酶。积累的磷酸酶对土壤磷素的有效性拥有重要作用。研究证明，磷酸酶与土壤碳、氮含量呈正相关，与有效磷含量
及pH也相关。磷酸酶活性是议论土壤磷素生物转变方向的强度的指标。磷酸苯二钠比色法

1）%磷酸苯二钠（用缓冲液配制）。
2）pH5醋酸盐缓冲液。
（pH=）
A：（，稀释至1000mL）
B：（
2H
3O

2H
3O
2Na·3H
2O定容至1000mL）
+
（3）氯代二溴对苯醌亚胺试剂：
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,6-二溴苯醌氯酰亚胺，用10ml96%乙醇溶解，贮于棕色瓶中，存放在冰箱里。保存的黄色溶液未变褐色从前均可使用。
（4）酚的标准溶液：
酚原液——取1g重蒸酚溶于蒸馏水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中。
酚工作液——取10ml酚原液稀释至1L（）。
5）甲苯。
6）%硫酸铝溶液。
标准曲线绘制：取1、3、
5、7、
9、11、13ml酚工作液，置于50ml容量瓶中，每瓶加入5ml缓冲液和4滴氯代二溴对苯醌亚胺试剂，显色后稀释至刻度，30min后比色测定。
以吸光度为横坐标，浓度为纵坐标（mg）绘成标准曲线。

称5g风干土置于200ml三角瓶中，，轻摇15min后，加入
%磷酸苯二钠（用醋酸盐缓冲液配制），仔细摇匀后放入恒温箱，在37℃%硫酸铝溶液并过滤。
吸取3ml滤液于50ml容量瓶中，尔后按绘制标准曲线所述方法显色。用硼酸缓冲液时，表现蓝色，在分光光度计上于660nm处比色。

磷酸酶活性，以24h后1g土