免疫共沉淀(CO-IP).docx

免疫共沉淀( CoIP )实验技术服务一、免疫共沉淀概述免疫共沉淀( Co-Immunoprecipitation , CoIP ) 只要以抗体和抗原之间的特异免疫反应为基础, 研究蛋白质与蛋白质间相互作用的经典方法。其基本原理是在细胞裂解液中加入抗原特异性的抗体, 抗体、抗原、以及与抗原具有相互作用的蛋白质通过抗原与抗体之间免疫沉淀反应将形成免疫复合物, 经过纯化, 洗脱, 收集免疫复合物, SDS-PAGE 电泳, western blo t 和(或)质谱可鉴定出与抗原相互作用的蛋白质。图1 :免疫共沉淀复合物二、技术服务优势与其他研究蛋白质相互作用技术(如 Pull down 、酵母双杂交等)相比,免疫共沉淀鉴定的相互作用蛋白是在细胞内与目的蛋白天然结合, 符合体内实际情况, 得到的蛋白可信度更高。三、技术服务流程图2 :免疫共沉淀技术服务流程四、服务内容 1、蛋白质抽提与定量; 2、免疫共沉淀(以 normal IgG 作为对照); 3、 SDS-PAGE 分离, western blot 和(或)质谱鉴定相互作用蛋白质; 4、实验报告提交。五、顾客提供 1、蛋白质样品(组织、细胞、蛋白质溶液等)、用于免疫共沉淀的一抗(如果公司抗体库里没有)及目的蛋白的相关信息; 2、需要通过转染载体表达基因的,提供表达载体,没有载体的本公司可以构建载体; 3、其他与免疫共沉淀相关信息。六、实验报告内容 1、免疫共沉淀电子图片及分析结果; 2、相互作用蛋白鉴定结果,质谱鉴定结果和(或) western blot 鉴定结果; 3、完整的实验步骤、使用仪器、软件检索参数等。