MS培养基配方.docx

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实验八MS培养基的配制和灭菌一、实验目的：
了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程和分装方法。
二、实验材料：
天平、牛角匙、量筒、烧杯、搅拌机、胶桶、组培瓶、6种母液、白沙糖、活性炭、卡拉胶。
三、方法步骤1、母液配制大: .
实验八MS培养基的配制和灭菌一、实验目的：
了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程和分装方法。
二、实验材料：
天平、牛角匙、量筒、烧杯、搅拌机、胶桶、组培瓶、6种母液、白沙糖、活性炭、卡拉胶。
三、方法步骤1、母液配制大量元素（母液I）mg/L100ml。（2）微量元素（母液U）（3）铁盐（母液川）（4）有机成分（母液W）IVA和WB⑸植物生长调节物质（2,4-D,NAA）以上各种营养成分的用量，除了母液I为10倍浓缩液外，其余的均为100倍浓缩液。
其中，母液I、母液U及母液V的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1L。
母液川的配制方法是：将称好的FeSO47H2O和Na2-EDTA2H2O分别放到450mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，，最后定容到1L，保存在棕色玻璃瓶中。
各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。
MS培养基中还需要加入2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、萘乙酸(NAA)、6苄基嘌呤(6BA)等植物生长调节物质，并且分别配成母液()。其配制方法是：分别称取这3种物质各10mg，将2，4-D和NAA用少量(1mL)无水乙醇预溶，将6BA用少量(1mL)，溶解过程需要水浴加热，最后分别定容至100mL，。
2、培养基配制
配制培养液用量筒从各种母液中分别取出所需的用量：母液I为100ml，母液U、M、IVA和WB各10ml。再取2，4-D10ml、NAA2ml，与各种母液一起放入烧杯中。
(1) 称取54g卡拉胶；300g蔗糖；活性炭1g。
(2) 在胶桶中加入规定量的各种母液，包括生长调节物质。
(3) 加水定容至1升，开搅拌机，搅匀混合液。定容至10升，搅匀。
向母液混合物加入白沙糖，继续搅拌；然后停一下搅拌机再加卡拉胶，开搅拌机混匀；接着再停搅拌机加活性炭，开搅拌机搅匀。
(6)调pH用滴管吸取物质的量浓度为1mol/L的NaOH溶液，逐滴滴入溶化的培养基中，边滴边搅拌，并随时用精密的pH试纸(〜)测培养基的pH，()
(7)将培养基分装到所选用的培养容器中，约30ml/瓶。
(8) 盖住瓶口
(9) 灭菌。待需要灭菌的物品码放完毕，盖上锅盖。在98kPa、，灭菌20min<
灭菌后取出锥形瓶，让其中的培养基自然冷却凝固。最好放置1d后再使用。
四、分析MS母液分得更加细，一般实验室只分大量元素、微量元素、铁盐、有机成分四大类。这里将大量元素