名词解释: 克隆: 来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。黏性末端: 被限制酶切开的 DNA 两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。回文结构: 在切割部位,一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。选择标记基因: 简称选择基因, 是指可使被转化的细胞获得其亲本细胞所不具备的新的遗传特性, 从而使得人们能够使用特定的选择培养基, 将转化的新细胞从亲本细胞群体中选择出来的一类特殊的基因. 基因探针: 是一段与目的基因互补的核酸序列, 可以是DNA , 也可以是RNA , 用它与待测样品DNA或RNA进行核酸分子杂交,可以判断两者的同源程度. Dot 印迹杂交: 将待测DNA或RNA的细胞裂解物变性后直接点在硝酸纤维素膜上, 不需要限制性酶进行酶切,既可与探针进行杂交反应. cDNA 文库:是指某生物某一发育时期所转录形成的 cDNA 片段与某种载体连接而成的克隆的集合。基因组文库: 把某种生物的基因组 DNA 切成适当大小,分别与载体结合,导入宿主细胞,形成克隆。汇集这些克隆,应包含基因组中的各种 DNA 顺序,每种顺序至少有一份代表。这样的克隆片段的总汇,叫基因组文库。固定化酶: 通过物理的或化学的方法, 将酶束缚于水不溶的载体上, 或将酶束缚于一定的空间内,限制酶分子的自由流动,但能使酶发挥催化作用的酶. 非水酶学: 通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的, 研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学. 交联型固定化酶: 借助双功能试剂使酶分子之间发生交联作用, 制成网状结构的固定化酶的方法。常用的双功能试剂有戊二醛、己二胺、顺丁烯二酸酐、双偶氮苯等。其中应用最广泛的是戊二醛。发酵工程: 采用现代工程技术手段, 利用微生物的某些特定功能, 为人类生产有用的产品的一种新技术。蛋白质工程: 就是以蛋白质的结构与功能为基础, 利用基因工程的手段, 按照人类自身的需要, 定向地改造天然的蛋白质, 甚至创造新的、自然界本不存在的、具有优良特性的蛋白质分子。细胞工程: 应用细胞生物学和分子生物学的理论、方法和技术, 按人的设计, 有计划地大规模培养组织或细胞以获得生物产品,或改变细胞的遗传物质以产生新的物种或品系。细胞融合: 两个或多个细胞相互接触后, 其细胞膜发生分子重排, 导致细胞合并、染色体等遗传物质重组的过程愈伤组织: 在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。贴壁细胞传代培养: 当原代培养的细胞相互汇合时, 细胞由原培养瓶消化、收集、稀释后传到新的培养瓶的过程。抗性互补筛选法: 利用亲本细胞原生质体对抗生素、除草剂及其它有毒物质抗性差异选择杂种细胞。细胞拆合: 是指以一定的实验技术从活细胞中分离出细胞器及其组分, 然后在体外一定条件下将不同细胞来源的细胞器及其组分进行重组, 使其重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器. 染色体转移:把同特定基因表达有关的染色体或染色体片段转入受体细胞,使该基因得以表达. 简答: 1. 目的基因的提取方法有那些?具体说明其原理? 目的基因的提取方法直接分离基因:鸟枪法人工合成基因:反转录法、根据已知的氨基酸序列合成 DNA 鸟枪法(散弹射击法): 用限制酶将供体细胞中的 DNA 切成许多片段, 将这些片段分别载入运载体, 然后通过运载体分别转入不同的受体细
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