厦门市专利奖申请书.docx

附件厦门市专利奖申报书
专利名称：一种金线莲指纹图谱的建立方法专利号：（盖章）：福建金草生物集团股份有限公司二。一四年_8_月25—日
厦门市知识产权局监制
厦门市专利奖申报项目基本情况表
专利量控制水平。
三、技术先进性评价材料
技术原创性及重要性1、技术原创性
本参评专利“一种金线莲指纹图谱的建立方法”首次引用“高效液相色谱法”鉴定金线莲品质，属国内首创技术，是基础型发明专利。
随着农业技术发展，金线莲人工培育的障碍解除，2010年后，国内己初步形成金线莲规模化种植。在金线莲的质量评价方面，目前国内外发表的文献中，一般采用显微鉴定、薄层色谱鉴定或单一成分含量测定等理化检查，不能准确鉴别福建、台湾金线莲和伪品的区别，评价金线莲药材质量的优劣。
本参评专利发明人克服现有的技术缺陷，运用高效液相色谱方法建立金线莲指纹图谱，运用指纹图谱的内参照峰作为参照，得到的各特征峰的相对保留时间和相对峰面积更稳定，精密度高，为金线莲的质量检测和质量控制提供标准。
具体步骤如下：
供试品溶液的制备：〜5g置于具塞三角烧瓶中，精密加入甲醇10-100mL密塞，精密称定，超声处理35-55分钟后，放冷至温室，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心7-15分钟后取上清液，将该上清液经滤膜过滤后，得到供试品溶液。
色谱条件：色谱柱以「八烷基硅烷键合硅胶为填料；洗脱方式：%磷酸和甲醇组成的梯度洗脱液为流动相，进行梯度洗脱；柱温：25-30C；紫外检测：
检测波长为313~318皿；流速：-;梯度脱洗的程序按以下体积浓度配置进行：
0分钟时，流动相为25%的甲醇和75%%磷酸溶液;30分钟时，流动相为50%的甲醇和50%%磷酸溶液;45分钟时，流动相为75%的甲醇和25%%磷酸溶液；55分钟时，流动相为75%的甲醇和25%%磷酸溶液；60分钟时，流动相为25%的甲醇和75%%磷酸溶液；65分钟时，流动相为25%的甲醇和75%%磷酸溶液。
（3）测定：精密吸收供试品溶液5此，将其注入高效液相摄谱仪，依照高效液相色谱法测定，得到指纹图谱。
图2-1:福建金线莲（尖叶）组培品的HPLC指纹图谱
图2-2:台湾金线莲（一等）组培品的HPLC指纹图谱图2-3:福建金线莲（大叶）野生品的HPLC指纹图谱图2-4:市售金线莲伪品的HPLC指纹图谱
2、技术重要性
福建省是全国金线莲产量最大的省份，金线莲产业具有得天独厚的优势，研究金线莲的人工培养增殖技术，对于促进金线莲的可持续利用，发展现代农业，振兴地方特色产业尤为必要。
（1）实现金线莲品质可控制。在本参评技术未成熟前，公司主要采用显微鉴定和薄层色谱鉴定，无法准确鉴别金线莲质量，金线莲质量安全方面存在一定的隐患，给公司经营销售带来一定的阻力。目前，本参评专利己成熟应用于包括福建金线莲、台湾金线莲在内的各品种金线莲检测，保证了公司金线莲产品的质量。
（2）优化良种选择，促进系统开发利用。运用高效液相色谱建立金线莲的指纹图谱，提高金线莲质量控制水平，促进优良金线莲品种的选择；运用内参照峰的指纹图谱作为参照，得到的各特征峰的相对保留时间和相对峰面积更稳定，方法精密度更好，有利于识别判定不同生长时期金线莲的有效成分及系统开发利用，优化金线莲种植周期，大幅提高原草利用率和附加值。
同时，由于本项技术成熟应用，在一定程度上帮助了公司取得药品生产许可证及GMP证书。
通过本技术的应用，将常规的单一指标成分或活性成分为质量控制的指标提升到一个新的阶段，采用高效液相色谱法获得指纹特征，通过指纹图谱得到的量化参数，更有效鉴别金线莲真伪及质量。
（二）技术优势本参评专利技术属国内首创，其具体技术优势主要体现在以下几个方面：
（1）检测成本低。本检测方法所需仪器主要有高效液相色谱仪、超声波清洗机，设备费川相对较低;此外还有色谱柱町反复使用、样品不被破坏、易回收。检测成本相对较低。
（2）高速，高效，高灵敏度。①分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个金线莲样品在15-30分钟，一般小于1小时。②分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比精馅塔和气相色谱薄层色谱的分离效能高出许多倍。③高灵敏度，,进样量在此数量级。
（3）准确评价金线莲质量。，精密加入甲醇20ml,密塞，精密称定，超声处理45分钟后，放冷至温室，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心10分钟后取上清液，，得到供试品溶液。同时，柱温30C；检测波长为316n