实验五福医大计数.ppt

实验五福医大计数
实验五 血小板计数
（2）操作步骤
1）吸取稀释液：准确吸取10g/
试管内。
2）采血：准确采血实验五福医大计数
实验五 血小板计数
（2）操作步骤
1）吸取稀释液：准确吸取10g/
试管内。
2）采血：准确采血20μl加入上述试管，立即充分混匀。
3）静置：待完全溶血后再混匀1min。
4）充池：混匀血小板悬液，并取1滴充入血细胞计数池，
静置10min。
5）计数：用高倍镜计数中央大方格内的中央及四角共5个
中方格内的 血小板数量。
实验五 血小板计数
（3）计算
血小板数/L=N×5×10×20×106=N×109/L
参考值： （100~300）×109/L
实验五 血小板计数
（4）注意事项
1）稀释液必须符合优质的血小板稀释液，因此稀释
液必须新鲜、洁净，无杂物和细菌污染；定期检
查稀释液的质量，实验前应先做稀释液空白计
数，符合仪器使用说明方可使用。
2）器材及操作必须标准化和规范化
①所用器材必须校准、洁净、干燥。
②采血、充液、计数均应规范，避免血小板激活或破坏。
③血小板悬液充入计数池后必须静置15min再计数，并在采
血后1h内完成计数。时间过短或过长则可导致血小板未完
全下沉或失去光泽，使计数结果偏低。
④充液前必须轻轻摇动血小板悬液2min或200次以上，但用力不宜过大，以免造成血小板破坏或产生气泡，引起计数误差。
⑤镜下观察时的光线要适中，并注意与细胞碎片、灰尘、微生物等鉴别。
3）及时核准血小板计数结果 由经验丰富的检验人员进行。
常用的方法有：
①用同1份血标本制备良好的血涂片，观察血小板数量、形
态和分布情况，进行核对。
②用血小板计数的参考方法核对计数结果。
③每份标本最好做2次计数，若2次计数误差小于10%，取
其均值报告；若计数误差大于10%，应做第3次计数，取
2次相近结果的均值报告。
4）排除非技术因素的影响
某些病理情况可干扰计数，出现血小板假性减少或增多。
①血小板聚集或凝集、异常蛋白血症、巨大血小板、卫
星现象、高脂血症导致血小板假性减少。
②HbH包涵体病人的红细胞碎片、慢性淋巴细胞性白血
病病人的淋巴细胞核和细胞质碎片、小红细胞等可被
误认为血小板，导致血小板假性增多。
5）标本采集
最好清晨采血，采集过程中应避免反复握拳、拍打采血部位、扎止血带的时间过长（＜1min），以免血小板激活而影响计数结果。
采血后立即进行血小板检测。
（5）方法学评价
1）普通光学显微镜直接计数法：
以草酸铵溶稀释液法为常规方法和参考方法。
2）相差显微镜直接计数法：
此法计数的准确性高，血小板易于识别，并可于照相
后核对计数结果，是计数血小板的参考方法。但由于
所用仪器昂贵，临床上较少选用。
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