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反相液相色法谱测定 10 种有机酸
马淑伟 郭亦如 杨定忠
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博纳艾杰尔科技 400-6068-099 ******@ 结果与讨论
2. 1 检测波长的选定
用200～350nm (紫外) 光对10种有机酸的标准溶液进行扫描,结果表明10种有机酸均在210nm附近
有较大的吸收,重复性好,不受流动相中其他物质的干扰,故以下实验均采用210nm 波长进行检测。
2. 2 流动相浓度的选择
、 、 的K2HPO4 溶液(用H3PO4 调pH ) ,对
各有机酸进行分离。结果表明: 逐步增加流动相中磷酸盐的浓度,有机酸均能得到分离,且不影响分离效
果，但考虑到色谱柱的使用寿命， mol/L.
2. 3 流动相pH 值的选择
以不同pH 值(用H3PO4 调节),测定各有机酸的保留时间,结果
显示流动相pH值对有机酸的分离影响很大。综合考虑各有机酸间的分离度和色谱柱的pH范围，.
2. 4 分离条件的优化
以分离的影响因素流动相pH值、乙腈含量、流速和柱温做正交试验对分离条件进行优化，最终得
到优化条件：（1）由于丁酸保留太强所以选用梯度洗脱；（2）；（ 3）柱温为30℃；

图 1 10 种有机酸图谱
1 甲酸 2丙酮酸 3 苹果酸 4 乳酸 5 乙酸 6 柠檬酸 7 琥珀酸 8 延胡索酸 9 丙酸 10 丁酸
2. 5 检测限、标准曲线、回收率
取同一果汁样品2 份,其中一份作本底,另一份添加一定量的10种有机酸标品溶液后测定各成分含量,
每份样品进行5 次平行测定,考察方法的回收率和精密度,以峰高A (mV) 对质量浓度C(mg/L) 求得线性
回归方程,以3 倍信噪比( S/ N ) 计算最小检测出限。
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